Glyoxyl agarose: A fully inert and hydrophilic support for immobilization and high stabilization of proteins

Triagem de suportes orgânicos e protocolos de ativação na imobilização e estabilização de lipase de Thermomyces lanuginosus

“…29 Vale ressaltar que a imobilização de enzimas em géis glioxil é realizada somente pelo ataque nucleofílico dos grupos amino dos resíduos lisina aos grupos aldeído do suporte. 18,19 Dentre os derivados preparados via glioxil, apenas aqueles provenientes de hidrogéis híbridos sem a coimobilização de leveduras é que apresentaram maior concentração de enzima imobilizada (1,80 mg/g de gel), duas vezes inferior ao gel preparado com ativação glutaraldeído. A imobilização de LTL em PHB previamente ativada com epicloridrina não foi realizada, devido à parcial solubilização do suporte na presença do agente de ativação.…”

“…A imobilização de enzimas em suportes com elevada concentração de grupos glioxil (grupos aldeído) permite a obtenção de derivados termoestáveis decorrentes da intensa interação dos resíduos lisina da enzima com os grupos glioxil do suporte, com a formação de bases de Schiff (-C=N-). 12,[17][18][19]21 Esta estabilização é devido à boa congruência geométrica de alguns suportes, como glioxil-agarose, que possibilita um correto alinhamento entre a enzima e o suporte, contribuindo para a formação de multi-interações que aumentam significativamente a estabilidade térmica dos derivados preparados. 12,17,18 Muitas enzimas têm sido estabilizadas em suportes glioxil, com atividade recuperada variando de 60 a 100% e elevada estabilização térmica, na maioria dos casos superiores a 10 3 e, em certos casos, estes valores são superiores a 10 5 .…”

“…12,[17][18][19]21 Esta estabilização é devido à boa congruência geométrica de alguns suportes, como glioxil-agarose, que possibilita um correto alinhamento entre a enzima e o suporte, contribuindo para a formação de multi-interações que aumentam significativamente a estabilidade térmica dos derivados preparados. 12,17,18 Muitas enzimas têm sido estabilizadas em suportes glioxil, com atividade recuperada variando de 60 a 100% e elevada estabilização térmica, na maioria dos casos superiores a 10 3 e, em certos casos, estes valores são superiores a 10 5 . [17][18][19] O suporte mais empregado na imobilização de enzimas por ligação covalente multipontual via glioxil é o gel de agarose, 12,17,18,[25][26][27]29,30 um suporte de alto custo e disponível comercialmente.…”

“…12,17,18 Muitas enzimas têm sido estabilizadas em suportes glioxil, com atividade recuperada variando de 60 a 100% e elevada estabilização térmica, na maioria dos casos superiores a 10 3 e, em certos casos, estes valores são superiores a 10 5 . [17][18][19] O suporte mais empregado na imobilização de enzimas por ligação covalente multipontual via glioxil é o gel de agarose, 12,17,18,[25][26][27]29,30 um suporte de alto custo e disponível comercialmente. 36 Entretanto, outros suportes de baixo custo alternativos à agarose, como quitosana e hidrogeis híbridos, têm sido empregados na imobilização e estabilização de enzimas de interesse industrial, apresentando resultados bastante atrativos.…”

Hydrolysis of casein and β-lactoglobulin by immobilized papain after pre-treatment with immobilized trypsin

“…In this case, the thermal stability of the immobilized enzymes could be an attractive alternative. Multipoint enzyme immobilization can enhance their stability via the prevention of subunit dissociation and, moreover, the unfolding rate of protein chains, promoting "rigidifi cation" of three-dimensional enzyme structures (ULBRICH-HOFMANN et al, 1999;MATEO et al, 2006). Different supports can be used.…”