Follow-up of experimental chronic Chagas' disease in dogs: use of polymerase chain reaction (PCR) compared with parasitological and serological methods

Araújo, Flávio Marcos Gomes; Bahia, Maria T.; Magalhães, N.M; Martins‐Filho, Olindo Assis; Veloso, Vanja Maria; Carneiro, Cláudia Martins; Tafuri, Washington Luiz; Lana, Marta de

doi:10.1016/s0001-706x(01)00196-6

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“…These results, together with those run with DNA from Leishmania amazonensis, L. braziliensis and L. chagasii, corroborated the specificity of our amplification system. Nevertheless, all negative filter paper samples revealed the 144 bp DNA fragment after addition of T. cruzi DNA thus confirming the inexistence of amplification inhibitor factors what was crucial to rule out the presence of inhibitors, that have already been reported by Breniere et al (1995) who used the same boiling procedure of the present study, and Araújo et al (2002) who used a more complex extraction procedure with phenol-chloroform extractions. Dorn et al (1999;2001) have associated amplification inhibition to the type of biological sample, suggesting that digestive tract samples, especially stomach contents are more prone to inhibit PCR.…”

Section: Discussionsupporting

confidence: 87%

Suitability of a rapid DNA isolation and amplification for detection ofTrypanosoma cruziinTriatoma infestansdry fecal spots collected on filter paper

et al. 2008

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Summary :A rapid DNA extraction was used for T. cruzi detection in triatomines dry fecal spots collected on filter paper and analyzed by PCR. Fifty T. infestans were fed on experimentally infected Balb/C mice with high T. cruzi parasitemia and divided into five groups of ten triatomines, and 100 triatomines were infected with lower parasitemia and divided into five groups of 20 triatomines. One dry fecal spot was analyzed per group on days 1, 2, 3, 4 and 5 post feeding. Amplification targeted T. cruzi TCZ sequence and resulted positive from day 4 after bugs feeding in the two models (high and lower parasitemia). The rapid DNA isolation and PCR proposed are suitable for detection of T. cruzi DNA in filter paper and should be considered in field research.

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Section: Discussionsupporting

confidence: 87%

Suitability of a rapid DNA isolation and amplification for detection ofTrypanosoma cruziinTriatoma infestansdry fecal spots collected on filter paper

et al. 2008

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“…The values observed with this technique, in experimental studies with dogs, reached more than 90% using blood or others tissues (ARAÚJO et al, 2002;VELOSO et al, 2008). Veloso et al (2008) obtained the highest levels in identifying parasitized experimentally infected Beagle dogs that were in the acute phase of infection, when the parasitemia levels were high.…”

Section: Resultsmentioning

confidence: 87%

First report of Trypanosoma cruziinfection in naturally infected dogs from southern Bahia, Brazil

Júnior

Almeida

Carvalho

et al. 2013

Rev. Bras. Parasitol. Vet.

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In order to verify the Trypanosoma cruzi infection in domestic domiciled dogs in a rural endemic area from the south region of the State of Bahia, Polymerase Chain Reaction (PCR) were performed using S35 and S36 primers in 272 dogs living in the district of Vila Operaria, in the municipality of Buerarema. All animals were clinically evaluated; 2.5 mL of blood were collected through venipuncture for the performance of molecular tests. None of these animals showed clinical signs of the illness and only two were identified with the DNA parasite. This result is the first report of natural infection by T. cruzi in domestic dogs in southern Bahia.Keywords: Trypanosoma cruzi, dog, PCR, Polymerase Chain Reaction, Bahia. ResumoCom o objetivo de verificar a infecção por Trypanosoma cruzi em cães domésticos domiciliados em área rural e endêmica do sul da Bahia, foi realizada a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), utilizando-se os iniciadores S35 e S36 em 272 cães domiciliados no distrito da Vila Operária, cidade de Buerarema. Todos os animais foram avaliados clinicamente e, posteriormente, foram coletados 2,5 mL de sangue por punção venosa para realização do diagnóstico molecular. Nenhum dos animais apresentou manifestação clínica da doença e, em apenas dois foram identificados DNA do parasito. Esse resultado é o primeiro relato de infecção natural por T. cruzi em cães domésticos no sul baiano.

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“…In the present study, the statistical analysis confirms the low sensitivity of hemoculture and the high specificity and sensitivity of PCR in T. cruzi detection, thus corroborating the studies by Araújo et al (2002), who found 100% positivity for PCR and only 22% for blood culture for experimentally infected dogs in 2002.…”

Section: Artigosupporting

confidence: 91%

Avaliação da técnica de hemocultura pela reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando os iniciadores P35/P36 e TCZ1/TCZ2 para a detecção de Trypanosoma cruzi em cães e gatos

Eloy¹

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1. Doença de Chagas -Botucatu (SP) 2. Doença de ChagasCampo Grande (MS) 3. Gato -Doenças 4. Cão -Doenças Palavras-chave: Cães; Doença de Chagas; Gatos; Reação em Cadeia da Polimerase; Trypanosoma cruzi DEDICATÓRIA Aos meus pais Sebastião (in memorian) e Dirce:Dedico à vocês este trabalho, por todo apoio, dedicação, carinho e amizade, e pela luz e referência sempre presentes em minha vida. As palavras nunca serão suficientes para agradecer. Amo vocês!Aos meus irmãos Du, Léa e Sônia, com a certeza de que podemos sempre contar uns com os outros. A toda minha família que sempre se fez presente, mesmo que de longe, me apoiando e me dando forças para alcançar meus objetivos.Obrigado a todos! À minha namorada Lisi por todo amor, amizade, respeito e companheirismo que foram únicos e especiais em todo este projeto.Te amo! "Seja bom com os outros. A distância que você caminha na vida vai depender da sua ternura com os jovens, da sua compaixão com os idosos, sua compreensão com aqueles que lutam, da sua tolerância com os fracos e os fortes. Porque um dia você poderá ser um deles." George Washington Carver. AGRADECIMENTOS• Primeiramente à Deus por mais esta conquista, dando-me coragem, sabedoria e perseverança para continuar a luta.• À minha orientadora Profa. Dra. Simone Baldini Lucheis, pela oportunidade da realização de mais uma passo importante em minha vida.• À Dra. Sueli Calvi por sua solicitude e por sempre favorecer o bom andamento de meu projeto no Laboratório de Doenças Tropicais da Faculdade de Medicina de Botucatu.• À Profa. Dra. Ana Luíza Castro da Universidade Federal de Campo Grande (UFMS) por disponibilizar seu laboratório de Bacteriologia para o desenvolvimento de parte deste projeto.• Aos Médicos Veterinários e funcionários do Centro de Controle de Zoonoses (CCZ) de Campo Grande-MS pelo apoio e ajuda com os animais, e em especial à Diretora Júlia Maksoud Brazuna, por permitir a realização desta pesquisa.• Aos Médicos Veterinários e funcionários do Canil Municipal de Botucatu-SP, por permitir a realização desta pesquisa, e pelo apoio e ajuda com os animais.• À Associação de Proteção Animal de Botucatu (APA), em nome de Maria José e Maria Lúcia, por disponibilizar os gatos para a colheita de sangue e propiciar a realização deste projeto.• À Lúcia, técnica do laboratório de Bacteriologia da UFMS, por sua colaboração e solicitude quanto ao uso desse laboratório.• Ao Carlinhos, técnico do Laboratório de Doenças Tropicais da Faculdade de Medicina de Botucatu, pela ajuda prestada.• Aos meus colegas Pós-Graduandos e Aprimorandos do Laboratório de Doenças Tropicais, em especial ao Thales, Talísia, Larissa, Vanessa, Eliana, Tatiane, Mariana, James e Daniela pela companhia, amizade, boa vontade e por sempre me ajudarem quando precisei. Muito RESUMOA doença de Chagas é uma zoonose, causada pelo Trypanosoma cruzi (T. cruzi), afetando também espécies de animais silvestres e domésticos. Os cães e os gatos têm grande importância no ciclo de transmissão deste parasita, sendo considerados os principais reservatórios domést...

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Follow-up of experimental chronic Chagas' disease in dogs: use of polymerase chain reaction (PCR) compared with parasitological and serological methods

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First report of Trypanosoma cruziinfection in naturally infected dogs from southern Bahia, Brazil

Avaliação da técnica de hemocultura pela reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando os iniciadores P35/P36 e TCZ1/TCZ2 para a detecção de Trypanosoma cruzi em cães e gatos

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