Diagnóstico molecular de tuberculosis extrapulmonar y sensibilidad a rifampicina con un método automatizado en tiempo real

Abstract

Contribución de los autores:Adrián Peñata: diseño del estudio, análisis e interpretación de los resultados y redacción del manuscrito Richard Salazar, Tatiana Castaño y Julián Bustamante: procesamiento de las muestras y recopilación de la información Sigifredo Ospina: gestión del proyecto, análisis y redacción del manuscrito Todos los autores participaron en la revisión de la bibliografía, la discusión y la aprobación del manuscrito. Introducción. La tuberculosis continúa siendo un problema de salud pública mundial, y la forma extrapulmonar representa entre 10 y 20 % del total de casos en personas inmunocompetentes, porcentaje que se incrementa en los portadores del virus de la inmunodeficiencia humana (HIV). Su diagnóstico es difícil con los métodos convencionales por la naturaleza paucibacilar de las muestras. La prueba Xpert ® MTB/RIF ha significado un importante avance en la detección molecular de Mycobacterium tuberculosis y hoy se utiliza en una variedad de muestras clínicas obtenidas de sitios diferentes a las vías respiratorias. Objetivo. Determinar la utilidad de la prueba Xpert ® MTB/RIF en la detección de M. tuberculosis y la sensibilidad a la rifampicina en pacientes con sospecha de tuberculosis extrapulmonar, atendidos en el Hospital Universitario de San Vicente Fundación de Medellín entre 2013 y 2014. Materiales y métodos. Se hizo un estudio descriptivo de corte transversal retrospectivo y prospectivo en 372 muestras consecutivas provenientes de 301 pacientes con sospecha de tuberculosis extrapulmonar, las cuales se analizaron mediante baciloscopia, cultivo en medio de Ogawa-Kudoh y prueba molecular Xpert ® MTB/RIF. Resultados. De los pacientes estudiados, 182 eran hombres (60 %) y la condición de base más frecuentemente diagnosticada fue la infección por HIV. Al tomar como referencia el cultivo, la sensibilidad y la especificidad general de la prueba molecular fueron de 94 % (IC 95% 83-100) y 97 % (IC 95% 95-99), respectivamente, y para la baciloscopia, fueron de 38,71 % (IC 95% 19-57) y 100 % (IC 95% 99-100), respectivamente. En el análisis estratificado por muestras se encontraron sensibilidades mayores de 75 %; 37 aislamientos fueron sensibles a la rifampicina y uno fue resistente. Conclusión. La prueba Xpert® MTB/RIF tuvo un buen desempeño en muestras de diferentes tejidos y líquidos, y constituye un avance significativo como apoyo para el diagnóstico de la tuberculosis extrapulmonar en términos de tiempo y porcentaje de positividad.Palabras clave: Mycobacterium tuberculosis, tuberculosis miliar, reacción en cadena de la polimerasa, ADN, rifampicina.

Evaluación del Xpert MTB RIF para el diagnóstico de tuberculosis y detección de resistencia a rifampicina en grupos vulnerables

“…Es importante señalar que los métodos convencionales no deben ser reemplazados en su totalidad pues provee el perfil de resistencia no sólo a RIF, sino también a otras drogas antituberculosas. 21,22 En esta investigación de los 21 casos de TB identificados por el ensayo molecular, el 71.4% se confirmó por el cultivo. El cultivo bacteriológico es la prueba de oro y desempeña un papel importante para el diagnóstico de Mtb, pero resulta muy lento y laborioso, además tiene una moderada S. 14,23 Los pacientes con examen directo negativo, dependen de los resultados del cultivo para poder comenzar el tratamiento, si la carga bacteriana de la muestra es muy baja puede suceder que la micobacteria no se desarrolle en el medio de cultivo.…”

Parallel Tests Using Culture, Xpert MTB/RIF, and SAT-TB in Sputum Plus Bronchial Alveolar Lavage Fluid Significantly Increase Diagnostic Performance of Smear-Negative Pulmonary Tuberculosis

“…Laboratory test results are an important and definitive basis for TB diagnosis ( Hu, 2008 ; Salina and Morozova, 2008 ; Melinte, 2009 ; Amaral and van Soolingen, 2015 ; Purohit and Mustafa, 2015 ; Purohit et al, 2015 ; Sharma et al, 2015 ; Shiferaw et al, 2015 ; Afsar and Afsar, 2016 ; Dunn et al, 2016 ; Procop, 2016 ; Shi et al, 2016 ; Bhirud et al, 2017 ). At present, the main clinical diagnostic methods for PTB are smear, culture, biophage, and molecular and immunological methods ( Brent et al, 2011 ; Barnard et al, 2012 ; Li et al, 2015 ; Wang et al, 2015 ; Huo and Peng, 2016 ; Penata et al, 2016 ; Shi et al, 2016 ; Gelalcha et al, 2017 ; Maharjan et al, 2017 ; Yadav et al, 2017 ). However, in terms of their sensitivity, all single tests have defects of varying degrees in clinical practice.…”

Paradoxical results of two automated real-time PCR assays in the diagnosis of pleural tuberculosis

“…Hillemann et al, in Germany, used Xpert 1 MTB/RIF in 113 pleural liquid samples and found a specificity of 98.1% compared to the culture. 5 In India, Alvarez-Uria et al, used Xpert 1 MTB/RIF in 75 samples of pleural liquid and obtained twice the positive results as with microscopy of fluorescence, 6 and recently Peñ ata et al 7 tested 48 pleural liquid samples from patients in a high-level Colombian hospital using Xpert 1 MTB/RIF, reporting 100% sensitivity and specificity compared with the culture.…”

“…However, some authors have used them to test this kind of sample and the principal modification in the testing of liquid samples was the concentration by centrifugation before transferring them to the cartridge. 7,12 [ 1 2 _ T D $ D I F F ]…”