Characterisation of M2e Antigenicity using anti-M2 Monoclonal Antibody and anti-M2e Polyclonal Antibodies

Abstract

ABSTRAKSumarningsih, Tarigan S, Hemmatzadeh F, Ignjatovic J. 2019. Antigenik karakterisasi pada protein M2e menggunakan antibodi monoklonal anti-M2 dan antibodi poliklonal anti-M2e. JITV 24(3): 122-134.Protein Matrik 2 ektodomain (M2e) memiliki sifat lestari dan dianggap sebagai antigen potensial untuk mendeteksi infeksi virus influenza A pada unggas yang divaksinasi (DIVA test). Namun studi yang mempelajari antigenisitas M2 dan respon imun pada manusia atau hewan masih sangat terbatas. Pada studi ini sifat antigenik dari masing-masing tujuh belas M2e peptida dan enam belas protein rekombinan M2e (rM2e) yang memiliki variasi asam amino (aa) pada posisi 10, 11, 12, 13, 14, 16, 18 dan 20 dibandingkan dengan metode western blot (WB) dan enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) menggunakan antibodi monoklonal (mAb) 14C2 dari tikus, dan anti-M2e poliklonal antibody (pAb) yang berasal dari ayam dan kelinci. MAb 14C2 memiliki kekuatan pembeda terbaik dan aa posisi ke-11 merupakan imunodominan paling penting yang mempengaruhi ikatan mAb14C2 hingga tingkat yang terbesar. Perubahan pada posisi 14, 16 dan 18 juga mempengaruhi pengikatan mAb14C2, dan perubahan ini terdeteksi pada semua metode (WB atau ELISA) dan antigen yang digunakan (M2e peptida atau protein rM2e). Untuk anti-M2e pAb dari ayam dan kelinci, aa imunodominan ditemukan pada posisi 10 dan perubahan pada posisi 11 tidak mempengaruhi reaksi antibodi. Pengikatan pAb kelinci juga dipengaruhi oleh perubahan pada aa posisi 14 dan 16, hal ini mengkonfirmasi kontribusi posisi tersebut terhadap antigenisitas M2e. Posisi 10 adalah satu-satunya posisi yang penting untuk pengikatan pAb ayam terhadap M2e. Secara keseluruhan penelitian ini menunjukkan antigenik M2e terletak di antara residu 10 -18 dan perubahan aa pada posisi 10, 11, 12, 14, 16 dan 18, dapat mempengaruhi ikatan antibodi di dalam protein M2e. Kata kunci: Virus Influenza A, epitop M2e, antigenisitas ABSTRACT Sumarningsih, Tarigan S, Hemmatzadeh F, Ignjatovic J. 2019. Characterisation of M2e antigenicity using anti-M2 monoclonal antibody and anti-M2e polyclonal antibodies. JITV 24(3): 122-134.