Resumo -Objetivou-se com o trabalho avaliar o efeito de herbicidas sobre a atividade microbiana do solo cultivado com cana-de-açúcar. O delineamento experimental utilizado foi de blocos casualizados, com quatro repetições. Os tratamentos foram arranjados em esquema fatorial 5 x 4. No Fator A alocou-se os genótipos de cana-de-açúcar: RB72454, RB835486, RB855113, RB867515 e RB947520 e no B os herbicidas: ametryn (2000 g ha -1 ), trifloxysulfuron-sodium (22,5 g ha -1 ), ametryn + trifloxysulfuron-sodium (1463 + 37 g ha -1 ) e uma testemunha capinada. Aos 15 e 45 dias após a aplicação dos herbicidas (DAT) coletou-se o solo rizosférico e determinou-se a respiração basal (C-CO2), o carbono da biomassa microbiana (CBM) e da razão dessas duas variáveis foi calculado o quociente metabólico (qCO2). Os efeitos dos herbicidas na microbiota do solo variaram em função do genótipo, sendo o RB835486 o material que mais influenciou o CBM, principalmente, aos 45 DAT, e o qCO2 foi mais afetado pelo RB72454. Os herbicidas, em especial o trifloxysulfuron-sodium, alteraram o CBM com incremento desta variável para a maioria dos genótipos tratados, além de promover a redução do qCO2 nos solos, demonstrando ser o herbicida que menos afetou negativamente os indicadores de qualidade biológica do solo. Os herbicidas ametryn e a mistura de ametryn + trifloxysulfuron-sodium afetam negativamente o C-CO2, o CBM e o qCO2, em especial quando aplicados sobre o genótipo RB72454. Palavras-chaves: Saccharum spp., impacto ambiental, inibidores de ALS e do fotossistema II Abstract -We aimed with this work to evaluate the effects of herbicides on microbial activity of soils planted with sugarcane. The experiment was installed in a randomized blocks design in a factorial scheme 5 x 4 with four replications. Factor A was composed by sugarcane genotypes (RB72454, RB835486, RB855113, RB867515 and RB947520) and B corresponded to the herbicides (ametryn, trifloxysulfuron-sodium and the formulated mixture ametryn + trifloxysulfuron-sodium), and a no herbicide control. At 15 and 45 days after herbicide application (DAT), the rhizospheric soil was collected for determination of the basal respiration (C-CO2),