[4] The preparation of antigenic Hapten-Carrier conjugates: A survey

Erlanger, Bernard F.

doi:10.1016/s0076-6879(80)70043-5

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“…The antibody titer against GAA-OVA conjugates increased as the booster number increased, suggesting that the GAA-BSA conjugates worked as immunogens; however, Erlanger reported that the optimal hapten number is between 8 and 25 molecules for BSA conjugates [19]. After performing cell fusion of splenocytes with myeloma cells using the polyethylene glycol (PEG) method and subsequent screening through limited dilution methods, one hybridoma cell line (12 A) producing MAb reactive to GAA was obtained.…”

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confidence: 99%

Detection of Ganoderic Acid A in Ganoderma lingzhi by an Indirect Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

et al. 2016

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Ganoderma is a genus of medicinal mushroom traditionally used for treating various diseases. Ganoderic acid A is one of the major bioactive Ganoderma triterpenoids isolated from Ganoderma species. Herein, we produced a highly specific monoclonal antibody against ganoderic acid A (MAb 12?A) and developed an indirect competitive ELISA for the highly sensitive detection of ganoderic acid A in Ganoderma lingzhi, with a limit of detection of 6.10?ng/mL. Several validation analyses support the accuracy and reliability of the developed indirect competitive ELISA for use in the quality control of Ganoderma based on ganoderic acid A content. Furthermore, quantitative analysis of ganoderic acid A in G. lingzhi revealed that the pileus exhibits the highest ganoderic acid A content compared with the stipe and spore of the fruiting body; the best extraction efficiency was found when 50?% ethanol was used, which suggests the use of a strong liquor to completely harness the potential of Ganoderma triterpenoids in daily life.

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confidence: 99%

Detection of Ganoderic Acid A in Ganoderma lingzhi by an Indirect Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

et al. 2016

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“…Para os animais habitualmente utilizados na produção de anticorpos (coelhos e camundongos), em geral são utilizadas as seguintes proteínas: as albuminas provenientes de soro bovino (BSA), de soro humano (HSA), de ovo de galinha (OVA); a tiroglobulina (TG), e a hemocianina (KLH) 26,27 . A metodologia química empregada para o acoplamento do hapteno às proteínas depende do grupo funcional presente, existindo, assim, diversos procedimentos para cada tipo de hapteno 24,[28][29][30] . Os métodos de conjugação usualmente empregados para a reação entre os grupamentos carboxila e amina, e a conseqüente formação do grupamento amida, são o método do anidrido misto 28 e o método do éster ativo 30 .…”

Section: Preparação Dos Imunógenosunclassified

“…A metodologia química empregada para o acoplamento do hapteno às proteínas depende do grupo funcional presente, existindo, assim, diversos procedimentos para cada tipo de hapteno 24,[28][29][30] . Os métodos de conjugação usualmente empregados para a reação entre os grupamentos carboxila e amina, e a conseqüente formação do grupamento amida, são o método do anidrido misto 28 e o método do éster ativo 30 . Logo após a conjugação, torna-se necessária a realização de uma etapa de purificação dos conjugados hapteno-proteína, antes da imunização 31 .…”

Section: Preparação Dos Imunógenosunclassified

“…Tais proteínas são formadas naturalmente por indução da reação com os antígenos (substâncias estranhas). Na maioria dos animais superiores, cinco classes distintas de moléculas de imunoglobulinas são conhecidas: IgG, IgA, IgM, IgD e IgE, diferindo-se uma das outras em tamanho, carga, composição de aminoácidos e conteúdo de carboidratos 23,28,31 . Em 1962, foi proposto um modelo básico para as imunoglobulinas: cadeias de proteínas com um número igual de cadeias pesadas (50-77 KDa) e de cadeias leves (~25 KDa).…”

Section: Natureza E Estrutura Dos Anticorposunclassified

“…Esta interação é quantificável, graças à utilização de marcadores. Os diferentes tipos de marcadores incluem os radioisótopos 1,23 , as enzimas 6,7,23 , a fluorescência 73 , a fosforescência 23,28 , a quimioluminescência 8,23,28 e a bioluminescência 74 . Os métodos mais usados até o presente momento utilizam enzimas e substratos colorimétricos, como aqueles empregados pela primeira vez por Miles e Hayes 75 , e posteriormente aplicados a ensaios imunológicos 9 .…”

Section: Projeto Do Ensaio Imunoenzimáticounclassified

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Métodos imunoquímicos para análise de contaminantes ambientais: conceitos, estado da arte e perspectivas

Nunes¹

2005

Quím. Nova

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Recebido em 6/2/04; aceito em 20/10/04; publicado na web em 28/2/05 IMMUNOCHEMICAL METHODS FOR ANALYSIS OF ENVIRONMENTAL CONTAMINANTS: CONCEPTS, STATE OF THE ART AND PERPECTIVES. Immunoassay techniques provide simple, powerful and inexpensive methods for analysis of environmental contaminants. However, the acceptance of immunoassays is dependent on the clear demonstration of quality and validity compared to more traditional techniques. In this review, primarily, the understanding and the fundamentals of immunoassay methods are given in order to make good use of immunoassays, especially of EIA tests. Special attention is given to the concepts related to the enzymelinked immunosorbent assay (ELISA) formats, such as inhibition concentration at 50% (IC 50 ), detection limit (LOD), cross-reactivity (CR %). It is also explained why some immunoassays are quantitative methods whereas others can only be used as screening methods. A list of main commercial kits for detection of priority pollutants is given in order to help analysts. Others formats, such as flowinjection immunoassay analysis (FIIA), immunoassay chromatography and immunosensors are also cited.Keywords: immunoassays; environmental contaminants; monitoring. INTRODUÇÃOA origem dos métodos imunológicos situa-se no final da déca-da de 50, quando Yalow e Berson 1 descreveram o primeiro ensaio imunológico para detectar insulina humana, o que lhes rendeu o Prêmio Nobel em 1977. A partir de então, as técnicas imunoquí-micas foram desenvolvidas como métodos de análise de macromoléculas (enzimas, hormônios), e posteriormente para moléculas orgânicas pequenas (drogas, fármacos), tendo seu maior êxito no campo da química clínica 2-4 . Em meados da década de 70, foi desenvolvido o primeiro ensaio biológico para pesticidas (aldrin e dieldrin) 5 . A este ensaio, seguiram-se outros, também baseados na marcação radioativa, chamados ensaios radioimunológicos ("radioimmunoassay, RIA"). Os ensaios imunoenzimáticos ("enzyme immunoassay, EIA") surgiram na década de 60 para identificação e localização de antígenos em preparações histológicas 2,6,7 , tendo sido a sua utilidade reconhecida posteriormente em outros campos distintos [8][9][10][11][12][13] . No início dos anos 80, começou-se a discutir as possibilidades que estes tipos de métodos analíticos podiam oferecer na detecção de contaminantes, tanto em amostras ambientais como de alimentos 12,14-16 , o que fomentou a sua aplicação no campo da química ambiental. A partir desse momento, começou-se a utilizar a marcação enzimática, que proporcionava menores riscos e apresentava sensibilidade similar aos métodos convencionais de análise 12,[15][16][17][18][19] . Inúmeras vantagens podem ser obtidas com a utilização dos métodos imunoquímicos e, paulatinamente, vão sendo disponibilizadas informações sobre diversos aspectos analíticos, tais como i) interpretação dos dados obtidos no desenvolvimento dos métodos; ii) estratégias utilizadas para a garantia da qualidade dos procedimentos operacionais; iii) análise dos dados e das informa...

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Enhanced visualization of parathyroid tissue by infusion of a visible dye conjugated to an antiparathyroid antibody

King¹,

Mills

Medina

1999

Head Neck

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[4] The preparation of antigenic Hapten-Carrier conjugates: A survey

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Detection of Ganoderic Acid A in Ganoderma lingzhi by an Indirect Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

Detection of Ganoderic Acid A in Ganoderma lingzhi by an Indirect Competitive Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

Métodos imunoquímicos para análise de contaminantes ambientais: conceitos, estado da arte e perspectivas

Enhanced visualization of parathyroid tissue by infusion of a visible dye conjugated to an antiparathyroid antibody

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