Monitoramento em cabine de segurança biológica: manipulação de cepas e descontaminação em um laboratório de micobactérias

Abstract

Objetivos: Verificar evidências da formação de aerossóis durante a manipulação de cepas de micobactérias para teste de sensibilidade às drogas (ANT) e identificação (TIP) e o efeito da descontaminação com solução de álcool 70% e luz ultravioleta (UV) na cabine de segurança biológica (CSB), após os procedimentos laboratoriais. Métodos: Uma placa foi exposta na CSB durante os procedimentos de ANT e TIP. Ao término, a CSB foi limpa e descontaminada com álcool 70% e exposta à luz UV por 15 minutos. Após esse tempo outra placa foi exposta por duas horas, somente com a ventilação da CSB ligada. As placas foram incubadas a 37°C e observadas por 30 dias. Os esfregaços das colônias isoladas foram corados pelas técnicas de Ziehl Neelsen e Gram, e as colônias de bacilo álcool-ácido-resistente (BAAR) foram identificadas pelos métodos tradicionais. Resultados: Nas 38 placas expostas durante o ANT, cresceram micobactérias em 10 placas (26,3%), fungos em uma (2,6%) e outros bacilos em duas (5,3%). Das placas com micobactérias, oito (80%) foram identificadas como M. tuberculosis e duas (20%) tiveram identificação inconclusiva. Mesmo após a descontaminação com álcool 70% e uso de UV, cresceram fungos em duas placas (5,3%) e cocos em outras duas (5,3%). Nas 30 placas colocadas nas CSB durante a TIP, cresceram micobactérias em 10 placas (33,3%), fungos em duas (6,6%), cocos em uma (3,4%) e uma mistura de micobactérias e outro bacilo em uma (3,4%). Não houve crescimento nas placas expostas após descontaminação das CSB com álcool a 70% e uso de UV ao término da TIP. Conclusão: Durante os procedimentos houve formação de aerossóis contendo micobactérias, fato que ficou comprovado pelo crescimento de colônias de micobactérias nas placas expostas. Técnicas laboratoriais adequadas devem ser respeitadas para minimizar a formação de aerossóis como também observar a experiência dos profissionais, a manutenção de um programa de capacitação e a manutenção periódica da CSB. abstract resumoObjectives: To verify the evidence of aerosol formation during the manipulation of mycobacteria strains for susceptibility (ST) and identification tests (IT) as well as the decontamination effect of alcohol solution 70% and ultraviolet (UV) radiation in biological safety cabinets (BSC) after laboratory procedures. Methods: One plate was exposed in a BSC during ST and IT procedures. Afterwards, the BSC was cleaned and decontaminated with alcohol solution 70% and exposed to UV radiation for 15 minutes. After that, another plate was exposed for two hours, only with the BSC ventilation on. Both plates were incubated at 37°C and observed for 30 days. The smears from the isolated colonies were stained with Ziehl Neelsen and Gram techniques, and acid fast bacilli (AFB) were identified by conventional methods. Results: In 38 plates exposed during ST, there was mycobacteria growth in 10 plates (26.3%), fungi in one (2.6%) and bacilli in two (5.3%). Among those plates that presented mycobacteria growth, eight (80%) were identified as M. tuberculosis and two (20%) had in...

Luz Ultravioleta Na Inibição Do Crescimento De Leveduras

“…As cabines de segurança biológicas (CSB) são consideradas o principal equipamento de contenção de micro-organismos nos laboratórios, sendo capazes de proporcionar a diminuição de aerossóis e borrifos gerados nos procedimentos realizados dentro delas (BRASIL, 2006). Dependendo das características de construção e aplicações, as CSB são classificadas em classe I, II e III, e a escolha para utilização dependerá dos riscos e dos agentes biológicos a serem manipulados (UEKI et al, 2008). Todas as CSB devem possuir em seu interior uma lâmpada ultravioleta (UV) e, segundo normas de biossegurança, após utilização da CSB, a luz UV precisa permanecer ligada durante 15 minutos para a descontaminação (BRASIL, 2006;SANGIONI, 2012).…”

“…Percebe-se também, que a prática laboratorial de utilizar 15 min de luz UV antes da manipulação em CSB é eficiente, porém existem limitações. Primeiro, deve-se estar ciente que a radiação UV é um método secundário, necessitando junto a ela empregar as boas práticas e descontaminação química, como hipoclorito de sódio ou álcool etílico (SANGIONI, 2012;UEKI et al, 2008). Também deve-se ressaltar que a luz UV não penetra em materiais, agindo apenas na superfície e que seu potencial é afetado pelo acúmulo de sujidades e pela distância do plano a ser desinfetado.…”

“…Também deve-se ressaltar que a luz UV não penetra em materiais, agindo apenas na superfície e que seu potencial é afetado pelo acúmulo de sujidades e pela distância do plano a ser desinfetado. Sendo assim, é importante adotar os cuidados devidos para alcançar melhores resultados de desinfecção (UEKI et al, 2008).…”