Leptospirosis serosurvey in bovines from Brazilian Pantanal using IGG ELISA with recombinant protein LipL32 and microscopic agglutination test

Abstract

This investigation was carried out in Brazilian Pantanal: region with important biodiversity. This region's climatic conditions, hydrology and geomorphology as well as the existence of great variety of wild species favor the maintenance of the Leptospira in the environment. The aim of this study was to evaluate IgG ELISA with recombinant protein LipL32 in comparison with microscopic agglutination test (MAT) and additionally contribute to the knowledge of the distribution of the one of most important worldwide zoonotic infection, assessing the seropositivity of bovine leptospirosis in beef cattle herds of Brazilian Pantanal, an important ecological preserved area, where cattle constitute not only the most important economic resource but also the major activity compatible of the conservation of natural resource of the region. Out of 282 samples of cattle serum analyzed, 143 (50.71%) were positive in MAT. The serovar Hardjo (genotypic Hardjoprajitno and Hardjobovis), Wolffi and Ballum showed the largest frequency of reactive samples. In the IgG ELISA rLipL32, 161 samples (57.09%) were positive. This result was higher than obtained by MAT (p<0.001). The sensitivity of the ELISA test was 99.30% and the specificity was 86.33%, based on the MAT. This test was shown to be a more sensitive, specific and accurate test for the diagnosis of bovine leptospirosis compared to the MAT.

Pesquisa de leptospiras e de anticorpos contra leptospiras em animais e humanos de propriedades rurais nos biomas brasileiros Pantanal e Caatinga

“…Logo em seguida à colheita, foi acoplado um filtro 0,22 µm na ponta da seringa para que, próximo a um bico de Bunsen com chama azul, fosse despejado, simultaneamente, 0,1 mL da urina filtrada em um tubo esterilizado contendo meio de cultura semissólido Fletcher -Difco R sem antibiótico e 0,1 mL em um tubo esterilizado contendo meio de cultura líquido Ellighausen, McCullough, Johnson e Harris -Difco R (EMJH) sem antibiótico (THIERMANN, 1980;ELLIS et al, 1982). Esses tubos foram acondicionados em recipientes fechados, ao abrigo da luz, em temperatura ambiente e avaliados semanalmente.…”

“…As amostras de urina foram semeadas nos meios de cultura de Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris (EMJH) e de Fletcher de acordo com a técnica descrita por Thiermann (1980) e Ellis et al (1982). Ao ser confirmado crescimento de Leptospira spp., foi retirado 1 mL do meio de cultura Fletcher correspondente, na região do anel de crescimento, e 1 mL do meio de cultura EMJH correspondente e colocado em tubos de polipropileno de 1,5 mL estéreis descartáveis para transporte até o Pellegrin et al (1999) destacaram que o Pantanal Mato-Grossense proporciona condições ecológicas altamente favoráveis à ocorrência da leptospirose, uma vez que o agente sobrevive mais tempo em áreas alagadas e de temperaturas elevadas (FAINE, 1999).…”

“…Em equinos, Pellegrin, Silva e Ribeiro (1994) observaram que 100% das propriedades apresentaram animais soropositivos, sendo Icterohaemorrhagiae e Hardjo as sorovariedades mais prevalentes e, como menos prevalentes, Canicola e Pomona. Ao contrário do que se observou no presente estudo sorológico, a sorovariedade mais comumente relatada em bovinos é a Hardjo, pertencente ao sorogrupo Sejroe (JULIA-NO et al, 2000;HOMEM et al, 2001;FAVERO et al, 2002;TOMICH et al, 2007;FIGUEIREDO et al, 2009;OLIVEIRA et al, 2010).…”

“…(CORRÊA, 2007). Tais espécies podem exercer papel de reservatório da sorovariedade para os animais domésticos, visto que comumente são vistos relatos de reações sorológicas em equinos (FAVERO et al, 2002) e em bovinos (JU-LIANO et al, 2000;HOMEM et al, 2001;TOMICH et al, 2007;FIGUEIREDO et al, 2009;OLIVEIRA et al, 2010) em diversos estados brasileiros.…”

“…Uma estirpe autóc-tone de L. interrogans Copenhageni foi isolada por Correa et al (2004), por Ahmed et al (2006) e por Fagundes et al (2008). Estudos sorológicos conduzidos por Aguiar et al (2007), Silva et al (2010) e também por Almeida et al (1994), Favero et al (2002), Corrêa et al (2004), Tomich et al (2007 Fagundes et al (2008) enfatizam os roedores como principal reservatório desta sorovariedade e alertam para sua possível transmissão para espécies domésticas e seres humanos.…”