O objetivo deste estudo foi avaliar o cultivo de Pleurotus ostreatus em substratos lignocelulósicos e o potencial antioxidante dos basidiomas cultivados. O inóculo foi adquirido da empresa Funghi & Flora. Foram preparados dois substratos, um à base de serragem de eucalipto (Eucalyptus sp.) e outro de casca de arroz (Oryza sativa). Foram avaliados os parâmetros de cultivo, como o tempo necessário para o início dos primórdios, o peso dos basidiomas e a eficiência biológica. Após crescimento e maturação dos basidiomas, foi realizada análise fitoquímica e do potencial antioxidante dos extratos. Os extratos foram preparados por extração a quente, utilizando-se aparelho de soxhlet e etanol como solvente. A análise fitoquímica foi realizada por meio de reações cromogênicas de caracterização, e o ensaio antioxidante foi conduzido por meio da absorção de radicais de oxigênio pelo método ORAC. Os resultados indicaram que o substrato à base de serragem foi mais promissor, tendo completado a corrida micelial no menor tempo, com aparecimento dos primórdios no 23º dia e com eficiência biológica maior (7,6%) em relação ao substrato com casca de arroz (6,7%). Quanto às análises fitoquímicas, houve resultado positivo para flavonoides e taninos em ambos os substratos, porém, a atividade antioxidante foi positiva apenas nos basidiomas cultivados em serragem.