Efeito Da Trealose Na Manutenção Da Viabilidade De Células De Leveduras Desidratadas Por Liofilização

Abstract

O presente trabalho teve por objetivo avaliar a influência da trealose endógena e também o uso da trealose como crioprotetor, na preservação da viabilidade celular de leveduras de interesse industrial quando submetidas ao processo de liofilização. Foram utilizadas as cepas TA (M-300-A) e SA (cepa isolada da Usina Santa Adélia S/A) da levedura Saccharomyces cerevisiae e a cepa IZ-1904 da levedura Saccharomyces boulardii, as quais passaram por um tratamento de acúmulo da trealose endógena, através de tratamento térmico a 45oC por duas horas em meio tampão citrato de potássio 2M, pH 4,0, acrescido de 2% de glicose, e, a seguir, foram suspensas em cada uma de três soluções crioprotetoras, que foram: leite desnatado a 10%, sacarose a 10% e trealose a 10%. Em seguida as massas de levedura foram liofilizadas e, aos 0, 10, 40 e 90 dias após o processo de liofilização, foram determinadas suas viabilidades. Para todos os crioprotetores, as culturas de levedura que passaram pelo tratamento de acúmulo da trealose endógena apresentaram maior viabilidade após a liofilização do que aquelas que não passaram pelo tratamento. Dentre os crioprotetores testados, a solução de leite desnatado a 10% foi o que proporcionou melhor crioproteção às células de levedura.<br>To evaluate the influence of the endogenous trehalose and also the use of trehalose as a cryoprotectant medium on the maintenance of yeast cell viability, after the freeze-drying process, strains TA (M-300-A) and SA (strain isolated from Usina Santa Adélia S/A) of the yeast Saccharomyces cerevisiae and the strain IZ-1904 of the yeast Saccharomyces boulardii were tested. After accumulation of endogenous trehalose by heat treatment at 45oC during 2 hours in a potassium citrate buffer (2M pH 4,0 with 2.0% glucose) the yeasts were suspended in one of three cryoprotectant solutions (skimmed milk 10%, sucrose 10% and trehalose 10%), freeze-dried and analysed for their cell viability after 0, 10, 40 and 90 days of storage. Higher viability maintenance after the freeze-drying process occured for all yeasts at the higher endogenous trehalose levels. The solution of skimmed milk 10% was the best cryoprotectant medium for the yeast cells

Efeito do congelamento sobre a viabilidade de células leveduriformes

“…A utilização de leite congelado para exame microbiológico pode ser uma prática adequada para um correto diagnóstico do agente etiológico envolvido, visto que o congelamento do leite permite aumentar o prazo para a realização do teste, possibilitando a estabilidade dos organismos presentes [1]. Segundo Gomes et al [9], o congelamento do leite não altera suas características químicas e microbiológicas, embora alguns microrganismos possam não suportar o processo [15].…”

Efeito do substrato e das condições de tratamento do fermento sobre a fermentação etanólica contaminada com leveduras <i>Saccharomyces cerevisiae</i> selvagens e <i>Lactobacillus fermentum</i>

“…Através do processo de difusão facilitada da membrana do micro-organismo, tais açúcares chegam ao interior da célula e iniciam o processo de catálise pela via glicolítica (CARTWRIGHT et al, 1989 (THEVELEIN, 1984;HOTTINGER et al,1987;PANEK et al, 1990; ALCARDE; BASSO, 1997 Embora a utilização de uma levedura qualquer selecionada seja uma alternativa viável para o início da safra, o uso de leveduras provenientes do próprio processo é a expectativa para o futuro das usinas brasileiras. A estabilidade microbiológica em relação às leveduras do processo de produção de álcool está relacionada à utilização de inóculo de uma levedura isolada do próprio processo (STROPPA;…”

Respostas fisiológicas e tecnológicas de linhagens industriais às condições estressantes da fermentação etanólica industrial

“…Inicialmente a trealose foi considerada uma molécula como reserva energética, como o glicogênio, devido a sua composição, porém, há vários anos a molécula tem sido associada à proteção e manutenção celular das leveduras durante processos de estresse (ALCARDE & BASSO, 1997). Diversas citações descrevem processos de proteção promovidos pela trealose, manutenção da viabilidade das leveduras (SUOMALAINEN & PFAFFLI, 1961;THEVELEIN, 1984; VAN LAERE, 1989;WIEMKEN, 1990), sobrevivência da célula em períodos de jejum (LILLIE & PRINGLE, 1980), elementos tóxicos (ATTFIELD, 1987), altas temperaturas , LEWIS et al, 1995, estresse hídrico (GADD et al, 1987;HOTTIGER et al, 1987;D'AMORE et al, 1991) e congelamento (LEWIS et al, 1987;D'AMORE et al, 1991).…”

“…A trealose é uma das formas de reserva de carboidratos das leveduras que é frequentemente associado à tolerância a estresses (ATTFIELD, 1987;WIEMKEN, 1990;ALCARDE & BASSO, 1997;YOSHIYAMA et al, 2015). …”