Variabilidade genética de Diadegma sp., parasitóide da traça-das-crucíferas, através de RAPD-PCR

Abstract

Ogênero Diadegma (Hymenoptera: Ichneumonidae) compreende espé-cies que são parasitóides de larvas de insetos de pequeno e médio tamanho e são consideradas muito eficientes para o controle da traça-das-crucíferas Plutella xylostella, uma das mais importantes pragas das plantas da família Brassicacea (Lepidoptera: Yponomeutidae) (Talekar e Shelton, 1993; Monnerat e Bordat, 1998;Monnerat et al., 2002; Guilloux et al., 2003). Este gênero possui distribuição mundial. Na região do Distrito Federal foi constatado que este inseto pode parasitar naturalmente 40% das larvas da traça-das-crucíferas, sendo portanto uma importante ferramenta para o controle biológico em olericultura (Monnerat, 1995; Guilloux et al., 2003).Mais de 200 espécies já foram descritas, entretanto a até bem pouco tempo havia muitas dúvidas quanto à identificação segura destes insetos, pois a mesma se baseava em aspectos morfológicos, que não eram suficientes para separar as espécies. Assim, espé-cies morfologicamente idênticas podiam apresentar diferenças no comportamento, biologia e hospedeiros (Noyes, MONNERAT (Oatman, 1978;Ooi, 1992; Talekar e Yang, 1991). Em muitos casos, as introduções foram feitas de forma desordenada, tornando extremamente difícil saber se uma certa espécie era endêmica ou introduzida.Nesta última década, ferramentas de biologia molecular têm sido empregadas para caracterização de material biológico em diversas áreas. Dentre essas, merece ser destacada a técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) (Steffan e Atlas, 1991). Esta técnica tem permitido estudos de polimorfismo em diferentes populações de insetos (Haymer, 1994;Lima et al., 2000).Este trabalho teve como objetivo comparar três populações de Diadegma sp. morfologicamente semelhantes, de espécies não determinadas, coletadas em diferentes partes do mundo, por meio da técnica de RAPD-PCR. MATERIAL E MÉTODOS InsetosOs insetos analisados foram coletados na Ilha da Reunião (sudeste da África), Brasil e Malásia, criados em laboratório e estocados a -80°C até serem utilizados. Os insetos coletados na Malásia foram identificados como D. semiclausum.Dez indivíduos adultos de cada população foram utilizados para os testes intra-específicos. Dez grupos de dez adultos de cada população foram utilizados para os testes inter-específicos.Extração e amplificação do DNA Para a obtenção do DNA foram avaliados os protocolos de extração descritos por Black et al. (1992), Langridge et al. (1991) e Möller et al. (1992). O método descrito pelo primeiro autor foi utilizado para todos os testes. O protocolo consistiu em (1) macerar os insetos em tampão TES (100mM TRIS, pH 8,0, 10 mM EDTA, 2%SDS), (2) deixar o macerado em repouso por 5 minutos, (3) incubar com proteinase K a 37°C por 15 minutos, (4) adicionar 100 µl de água e incubar por mais 15 minutos a 37°C, (5) ABSTRACT Genetic variability of Diadegma sp., parasitoid of diamondback moth using RAPD-PCRThe genus Diadegma has species that are parasitoids of larvae of diamondback moth, Plutella xylostella, one of the most important pests...

Genetic Variability of Spodoptera frugiperda Smith (Lepidoptera: Noctuidae) Populations from Latin America Is Associated with Variations in Susceptibility to Bacillus thuringiensis Cry Toxins

“…Monnerat et al (18) showed that there is no intrapopulation genetic variability for three species of Diadegma (Hymenoptera: Ichneumonidae), an important parasitoid of Plutella xylostella. Tsai et al (26) demonstrated the effectiveness of this technique in the phylogenetic analysis of the microsporidian Nosema isolated from different lepidopteran larvae, such as Spodoptera littura, S. exigua, Helicoverpa armigera, P. xylostella, and Pieris spp., showing that isolates from Pieris spp., S. exigua, and H. armigera were phylogenetically related.…”