Comparação entre duas metodologias para a realização do teste de redução do tetrazólio nitroazul (NBT) em caprinos

Abstract

Resumo: O teste de redução do tetrazólio nitroazul (NBT) é um dos métodos mais utilizados para a avaliação do metabolismo oxidativo dos neutrófilos. Porém, o custo por amostra e o tempo de utilização do corante são desvantagens do método. O objetivo deste trabalho foi comparar duas metodologias para realização do teste do NBT a fim de maximizar a sua utilização e diminuir o custo por amostra processada. Foram utilizadas 10 cabras, adultas clinicamente sadias e colhidas amostras de sangue por meio de venipunção jugular em tubos de 10mL sendo retirada uma alíquota de 500μL em tubo "eppendorff" contendo 2μL de heparina. Através desta alíquota foram realizadas três metodologias para o teste do NBT: A) técnica original Park & Good (1970); B) redução de 50% do volume do corante; C) redução de 50% e armazenamento do corante a -20°C por 180 dias. Foram confeccionados e corados esfregaços sanguíneos (May Grünwald-Giemsa) das amostras com as metodologias propostas e realizada contagem de 100 neutrófilos em microscopia óptica para determinar o percentual de neutrófilos reativos ao NBT. A análise estatística pelo método de Análise de Medidas Repetida (ANOVA) demonstrou diferenças significativas (P<0,05) entre os dois métodos e o original (A=14,4±4,6; B=1,9±1,4; C=1,1±0,9), porém apresentou alta correlação pelo teste de Spearman entre os métodos (rs=0,82 (AxB), rs=0,75 (BxC) e rs=0,93 (AxC)). Conclui-se que o teste de Redução do Tetrazólio Nitroazul (NBT) segundo a metodologia descrita por Park & Good (1970) e a redução do corante em 50% do seu volume e a sua redução associada ao congelamento por 180 dias a -20ºC podem ser realizadas em caprinos, porém os valores devem ser comparados com as respectivas metodologias utilizadas.

The effect of bovine vaccines against respiratory viruses administered either intranasal or intramuscular on broncho-alveolar fluid cells of heifers

“…Oxidative metabolism is an oxygen-dependent antibacterial mechanism, which also occurs in neutrophils, eosinophils, and monocytes (Fonteque et al 2015 ). This function is initiated by cell phagocytosis, followed by the production of reactive oxygen species (ROS), which promote the elimination of internalized pathogens (Burgos et al 2011 ; Fonteque et al 2015 ).…”

“…Oxidative metabolism is an oxygen-dependent antibacterial mechanism, which also occurs in neutrophils, eosinophils, and monocytes (Fonteque et al 2015 ). This function is initiated by cell phagocytosis, followed by the production of reactive oxygen species (ROS), which promote the elimination of internalized pathogens (Burgos et al 2011 ; Fonteque et al 2015 ). This mechanism is important to keep the respiratory tract healthy, and if this activity is reduced, it is difficult to eliminate infectious agents, consequently increasing the chance of developing bacterial pneumonia (Du Manoir et al 2002 ; Bertagnon et al 2017 ).…”