Inibidor de tripsina em raízes de Eucalyptus urophylla

Abstract

As raízes de eucalipto (Eucalyptus urophylla) podem estar associadas a fungos como Pisolithus tinctorius, formando uma simbiose conhecida como ectomicorriza, mas também podem estar colonizadas por fungos patogênicos, como Rhizoctonia solani, agente causal do tombamento de plantas em viveiros. O objetivo deste trabalho foi verificar a presença de atividade inibitória de tripsina, uma serino-protease, em raízes de E. urophylla e a atividade de tripsina em filtrados desses fungos. Alíquotas de extrato protéico bruto de raízes de E. urophylla e frações protéicas parcialmente purificadas por cromatografia de exclusão molecular, do tipo Sephacryl S-100-HR, foram testadas para atividade inibitória de tripsina. Proteínas do extrato ou das frações, quando incubadas com o substrato BAPNA (a-benzoil-arginina-p-nitroanilida) e tripsina comercial na presença de tampão Tris-HCl 0,1 M (pH 8,0), resultou em atividade de inibidor de tripsina ao redor de 80%. Filtrados de meios de cultura de P. tinctorius e R. solani foram parcialmente purificados em cromatografia de exclusão molecular, porém atividade de tripsina sobre o substrato BAPNA não foi verificada em nenhuma das frações. Portanto, não foi possível estabelecer uma correlação direta entre o inibidor da planta e proteases dos fungos. Os resultados apresentados abrem novas perspectivas para o estudo dessas proteínas nas interações entre patógenos e simbiontes para espécies de eucalipto.

Detecção de inibidores de tripsina e atividade hemaglutinante em sementes de leguminosas arbóreas da amazônia

“…Desta forma, essas proteínas são classificadas de acordo com a sua especificidade de interação e podem afetar a atividade de serinoproteinases, cisteínoproteinases, proteinases aspárticas e metaloproteinases, as quais compreendem os grandes grupos de enzimas proteolíticas (Richardson, 1991;Tremacoldi & Pascholati, 2004). As lectinas, por sua vez, são proteínas ou glicoproteínas que interagem especificamente com carboidratos de diferente natureza química, resultando na aglutinação de células animais e/ou vegetais e na precipitação de polissacarídeos, glicoproteínas ou glicolipídeos (Kennedy et al, 1995;Babosha, 2008).…”

Inibidor de tripsina em >i<Eucalyptus urophylla>/i< e seu efeito sobre o crescimento micelial >i<in vitro>/i< de >i<Pisolithus tinctorius>/i< e >i<Rhizoctonia solani>/i<

“…Com a finalidade de se verificar se a atividade inibitória para tripsina encontrada nas sementes de E. urophylla também era encontrada nas raízes, local da planta onde realmente ocorre o reconhecimento em relação ao simbionte ou ao patógeno, uma metodologia para a produção de plântulas, mesclando características básicas de produção em substrato vermiculita com outras de cultura de tecidos, foi aqui encontrada (Tremacoldi & Pascholati, 2000). Isso porque a obtenção de plântulas em vermiculita ou substratos orgânicos, rotineiramente utilizados comercialmente, apresenta a desvantagem da incorporação de resíduos às raízes Jovens e porosas, indesejável para sua utilização com fins de análises bioquímicas.…”