Análise de glicocorticosteróides por CG-EM: uma nova abordagem de derivatização para o controle de dopagem no esporte

Abstract

Recebido em 30/10/01; aceito em 28/3/02 ANALISYS OF GLUCOCORTICOSTEROIDS BY GC-MS: A NEW APPROACH OF DERIVATIZATION STEP FOR DOPING CONTROL IN SPORT. Glucocorticosteroids (CT) show a powerful anti-inflammatory effect. In view of this, they are extensively used in sports medicine, but their misuse (systemic administration) can lead to severe injuries on athletes and has been restricted by the IOC in recent years. For GC-MS analysis, a derivatization step is necessary in order to convert them to a stable form, thus preventing thermal breakdown with the loss of the ketone side chain. Derivatization of CT is reviewed and a new approach of silylation is presented for screening of CT in urine.Keywords: glucocorticosteroids; GC-MS; doping control. INTRODUÇÃOGlicocorticosteróides (CT) são esteróides polifuncionais secretados pela supra-renal que apresentam como funções principais a homeostasia de eletrólitos como o íon sódio (Na + ) e potássio (K + ), a mediação no metabolismo de carboidratos, proteínas e lipídios e, principalmente, uma potente ação antiinflamatória 1 . Esta ampla gama de efeitos gerada pela administração de CT endógenos e sintéticos resulta em uma série de aplicações terapêuticas que vão do tratamento da artrite até a terapêutica de neoplasias malignas 1,2 . A Figura 1 esquematiza a biossíntese dos esteróides endógenos 1-3 . A principal utilização de CT em desacordo com a sua destinação médica está relacionada à dopagem esportiva, tanto em humanos como em animais (especialmente cavalos de corrida) 4,5 . A principal razão para a utilização de CT está relacionada à sua ação antiinflamatória e analgésica 6,7 . A utilização de CT permite a participação de atletas (e animais) com lesões articulares em provas esportivas reprimindo provisoriamente a dor e a inflamação. Disto resultam conseqüências gravíssimas para o atleta, freqüentemente irreversíveis.Pelo exposto, o Comitê Olímpico Internacional (COI) restringe a utilização sistêmica de CT. Deste modo, administrações pelas vias oral, retal, intravenosa e intramuscular ficam proibidas. Administrações intra-articulares e tópicas são permitidas, desde que previamente declaradas por um médico responsável 8,9 . Ao longo das últimas duas décadas, técnicas analíticas como a cromatografia líquida com detector de ultravioleta (CLAE-UV) 10,11 , cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas (CLAE-EM) 4,11-13 e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas com ionização negativa (CG-EM-IN) 5-7,14 e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas por ionização positiva (CG-EM)15-27 têm sido empregadas na detecção de esteróides polifuncionais.A técnica de CLAE-UV apresenta como maiores limitações a baixa sensibilidade e a baixa especificidade devido à falta de informação estrutural sobre o analito de interesse. Tanto a CLAE-EM como a CG-EM-IN têm merecido grande destaque por sua alta sensibilidade. Entretanto, o emprego de tais técnicas de triagem em laboratórios de controle de dopagem se torna crítico, uma vez que são exigidos, entre outr...

The importance of pharmaceutical surveillance in forensic toxicology in the field of public health

“…It is natural for every athlete to try to get the best possible performance in their sport in order to win victories and break records. To this do so, many adhering to illicit drugs such as diuretics, anabolic and various stimulants (PEREIRA et al, 2002).…”

Optimization of serum sample preparation aiming at metabolomics analysis by comprehensive two-dimensional gas chromatography coupled to mass spectrometry

“…Silylating reagents react only with polar functional groups that have a replaceable hydrogen atom [3] , which is the reason for a two-step derivatization. In the first reaction, methoxyamine was used to protect the carbonyl functional groups by forming methoxyoximes [4] .…”

Human Metabolism of The Anabolic Steroid Methasterone: Detection and Kinetic Excretion of New Phase I Urinary Metabolites and Investigation of Phase II Metabolism by GC-MS and UPLC-MS/MS

“…For GC-MS analysis, the capsule and urine residues were dried in a vacuum oven at room temperature for 30 min and then derivatized with 100 μL of MSTFA/ NH 4 I/2-mercaptoethanol (1000:2:6, v:m:v) by heating for 20 min at 60 °C. 22 For UPLC-MS/MS analysis, the urine residues were resuspended in 1 mL of a mixture of H 2 O:…”