Polyembryony and identification of Volkamerian lemon zygotic and nucellar seedlings using RAPD

Andrade-Rodríguez, María; Villegas-Monter, Ãngel; Carrillo-Castañeda, Guillermo; García-Velázquez, Armando

doi:10.1590/s0100-204x2004000600006

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“…The random amplified polymorphic DNA (RAPD) are molecular markers characterized by their abundance in the genome; they are highly polymorphic and simple to use, although, to guarantee their reproducibilty, amplification process should be optimized (Valadez Moctezuma & Kahl, 2000). This makes it possible to use RAPD to differentiate zygotic from nucellar seedlings in early stages, as reported by Cordeiro et al (2006) for mango, and Andrade-Rodríguez et al (2004, 2005 and Rao et al (2008) for citrus.…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 81%

“…The endocarp and seed coat (testa with tegmen wrapping all embryos) were removed from each seed, and the number of embryos per seed was determined. We calculated the percentage of seeds having one to seven embryos, the percentage of polyembryony, and the number of embryos per seed (Andrade-Rodríguez et al, 2005).…”

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

“…Different morphological and biochemical markers have been used to distinguish nucellar from zygotic seedlings, but none is as efficient as molecular markers (Andrade-Rodríguez et al, 2004;Rao et al, 2008). The random amplified polymorphic DNA (RAPD) are molecular markers characterized by their abundance in the genome; they are highly polymorphic and simple to use, although, to guarantee their reproducibilty, amplification process should be optimized (Valadez Moctezuma & Kahl, 2000).…”

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

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Identification of zygotic and nucellar seedlings in polyembryonic mango cultivars

Martínez-Ochoa

Andrade-Rodríguez

Rodríguez

et al. 2012

Pesq. agropec. bras.

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-The objective of this work was to evaluate the occurrence of polyembryony in the mango cultivars Manila and Ataulfo, and to determine whether seedlings cultured in vitro are zygotic or nucelar. Percentage of polyembryony was calculated and the number of embryos in 100 seeds of each cultivar was recorded. 'Manila' exhibited 97% polyembryony with 3.4 embryos per seed, while 'Ataulfo' had 95% polyembryony with 3.2 embryos per seed. Later, 20 seeds of each cultivar were established in vitro, and it was analyzed those in which all embryos germinated (12 seeds from 'Manila' and 7 from 'Ataulfo'). DNA was extracted from seedling leaf tissue, and its origin was identified with 14 RAPD primers. The polymorphic markers recognized the seedlings of sexual origin in seven of nine 'Manila' polyembryonic seeds, and in four of seven 'Ataulfo' ones. Also, in polyembryonic seeds not all zygotic seedlings were produced by small embryos located at the micropyle.Index terms: Mangifera indica, embryo culture, funiculus, molecular markers, polymorphism. Identificação de plântulas zigóticas e nucelares em cultivares de manga poliembriônicasResumo -O objetivo deste trabalho foi avaliar a ocorrência de poliembrionia nas mangas 'Manila' e 'Ataulfo' e determinar se as plântulas cultivadas in vitro são zigóticas ou nucelares. A percentagem de poliembrionia foi calculada e o número de embriões em 100 sementes de cada cultivar foi determinado. 'Manila' apresentou 97% de poliembrionia com 3,4 embriões por semente, enquanto 'Ataulfo' teve 95% de poliembrionia com 3,2 embriões por semente. Posteriormente, 20 sementes de cada cultivar foram cultivadas in vitro, tendose analisado aquelas em que todos os embriões germinaram (12 sementes de 'Manila' e sete de 'Ataulfo'). O DNA foi extraído a partir de tecidos foliares das plântulas, e sua origem foi identificada com 14 iniciadores RAPD. Os marcadores polimórficos reconheceram o embrião de origem sexual em sete das nove sementes poliembriônicas de 'Manila' e em quatro das sete sementes de 'Ataulfo'. Além disso, nem todas as plântulas zigóticas foram produzidas por embriões pequenos localizados no micrófilo das sementes poliembriônicas.Termos para indexação: Mangifera indica, cultura de embriões, funículo, marcadores moleculares, polimorfismo.

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Section: Introductionmentioning

confidence: 81%

Section: Methodsmentioning

confidence: 99%

Section: Introductionmentioning

confidence: 99%

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Identification of zygotic and nucellar seedlings in polyembryonic mango cultivars

Martínez-Ochoa

Andrade-Rodríguez

Rodríguez

et al. 2012

Pesq. agropec. bras.

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“…As diversas técnicas geradas para a identificação do embrião sexual, como o uso de marcadores isoenzimáticos (Medeiros et al, 2000) e RAPD (Andrade-Rodríguez et al, 2005), entretanto, são muitas vezes inviáveis sob o ponto de vista econômico. Assim sendo, a eliminação ou redução da manifestação da poliembrionia torna-se importante, podendo ser viabilizada pelo cultivo in vitro dos primeiros embriões que se formam em sementes poliembriônicas, com base na pressuposição de que estes possuem grande possibilidade de serem zigóticos, conforme sugerido por Vásquez Araújo (1991).…”

Section: Introductionunclassified

Adequação de nutrientes do meio MT para o cultivo de embriões imaturos de tangerineira 'Cleópatra'

Morais-Lino¹,

Souza

Filho

et al. 2008

Rev. Bras. Frutic.

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Este trabalho teve como objetivo ajustar a concentração de macronutrientes, micronutrientes e vitaminas do meio de cultura Murashige & Tucker (MT), de modo a permitir a germinação de embriões imaturos, menores que 3 mm, de tangerineira 'Cleópatra'. As sementes foram obtidas a partir de frutos com 4 a 5 meses após a antese, cujos embriões não germinam nos meios de cultura atualmente indicados para citros. Inicialmente, os embriões foram cultivados em meio de cultura básico contendo sacarose e ágar, seguindo uma seqüência de etapas, procedendo-se a ajustes da concentração normal dos macronutrientes (1/1, ½ e ¼), micronutrientes (1/1, ½, ¼ e 1/1, 3/2, 2/1) e vitaminas (2/1, 1/1 e ½) do meio MT. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em um esquema fatorial 3 (concentrações do MT) x 4 (comprimentos de embriões), com 10 repetições. As variáveis, porcentagem de germinação de embriões, porcentagem de plântulas normais e comprimentos dessas plântulas foram avaliadas 30 dias após a inoculação dos embriões em meio de cultura. Os melhores resultados foram obtidos utilizando-se de metade da concentração normal de macronutrientes, não havendo necessidade de alterar as concentrações de micronutrientes e vitaminas.

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“…Em citros, marcadores RAPD (Random Amplified Polymorphic DNA) têm sido utilizados em estudos de diversidade genética (Machado et al, 1995;Bastianel et al, 1998;Nicolosi et al, 2000;Oliveira et al, 2002a;Andrade et al, 2004). Marcadores AFLP (Amplified Fragment Lenght Polymorphism), por sua vez, são considerados mais eficientes que RFLP (Restriction Fragment Lenght Polymorphism), RAPD e SSR (Single Sequence Repeat), pela sua alta reprodutibilidade e elevada taxa multiplex, ou seja, número de marcadores simultaneamente analisados em um mesmo gel, e vêm sendo utilizados para análise de diversidade genética em muitas espécies vegetais (Pejic et al, 1998).…”

Section: Introductionunclassified

Diversidade genética entre híbridos de laranja-doce e tangor 'Murcott' avaliada por fAFLP e RAPD

Bastianel

Oliveira

Cristofani

et al. 2006

Pesq. agropec. bras.

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Resumo -O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade genética em uma população de 148 híbridos de tangor 'Murcott' (Citrus reticulata Blanco x C. sinensis L. Osbeck) e laranja 'Pêra' (C. sinensis L. Osbeck) obtidos por polinização controlada, pelo uso de marcadores fAFLP e RAPD. Marcadores polimórficos (416 marcadores fAFLP e 33 RAPD) foram utilizados para avaliar a similaridade genética entre os híbridos, calculada com o coeficiente Jaccard pelo método UPGMA. A consistência de cada agrupamento foi determinada pelo programa BOOD. Houve alta similaridade genética entre os parentais. A laranja 'Pêra' apresentou maior número (132) de loci em heterozigose em relação ao tangor 'Murcott' (105), corroborando a teoria de origem híbrida para a laranja-doce. Observaram-se dois grupos distintos de plantas, e um deles abrangeu 80% dos híbridos com maior similaridade com a laranja 'Pêra'. A análise bootstrap não revelou consistência estatística entre esses grupos. Marcadores fAFLP são mais eficientes na avaliação do polimorfismo, sendo indicados para seleção de indivíduos híbridos mais próximos a um dos parentais.Termos para indexação: citros, marcadores moleculares, similaridade genética. Genetic diversity among hybrids of sweet orange and 'Murcott' tangor evaluated by fAFLP and RAPD markersAbstract -The objective of this work was to evaluate the genetic diversity in a population of 148 hybrids of 'Murcott' tangor (Citrus reticulata Blanco x C. sinensis L. Osbeck) and 'Pêra' sweet orange (C. sinensis L. Osbeck), obtained by controlled polination, using fAFLP and RAPD markers. Polymorphic markers (416 fAFLP and 33 RAPD markers) were used to evaluate genetic similarity among the hybrids, calculated by the coefficient of Jaccard, using the UPGMA method. The consistency of each group was determined by software BOOD. There was high genetic similarity within the parents. 'Pêra' sweet orange had a higher number of loci in heterozygosis (132) compared to 'Murcott' tangor (105), supporting the theory of hybrid origin for sweet oranges. Two distinct groups of plants were observed: one group had 80% of the hybrids that displayed higher genetic similarity with 'Pêra' sweet orange. The bootstrap analysis did not show consistence between the groups. The fAFLP markers are more efficient to obtain polymorphism than RAPDs and are more suitable to select hybrids closer to the parents.

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Polyembryony and identification of Volkamerian lemon zygotic and nucellar seedlings using RAPD

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