An immunohistochemic assay to localize leptospires in tissue specimens

Alves, Venâncio Avancini Ferreira; Yasuda, Paulo Hideki; Yamashiro, E.; Santos, R. T. M.; Yamamoto, Luzia Umeda; Brito, Thales de

doi:10.1590/s0036-46651986000300006

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“…Primary antibodies ( Table 2 ) were produced in previous studies 14 , 17 , 20 . Briefly, anti- Leptospira 20 , anti-Lp25 14 and anti-LipL32 17 were prepared by the hyper immunization of rabbits with a cellular suspension of Leptospira interrogans serovar Icterohaemorrhagiae strain R192, or with recombinant purified Lp25 or LipL32 proteins, respectively. The anti- Leptospira (anti-L) serum was used in the immunohistochemistry procedures to characterize the pathological features of leptospirosis in liver, kidney and muscular samples.…”

Section: Methodsmentioning

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Section: Antibodiesmentioning

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Immunohistochemical detection of Lp25 and LipL32 proteins in skeletal and cardiac muscles of fatal human leptospirosis

Iglezias

Abreu

Kanamura

et al. 2020

Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo

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Immunohistochemical detection of Lp25 and LipL32 proteins in skeletal and cardiac muscles of fatal human leptospirosis

Iglezias

Abreu

Kanamura

et al. 2020

Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo

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“…1 , sendo agora introduzida a pré-digestão protéica com tripsina tipo II de pâncréas de porco (Sigma, USA) , 15 mg% em tampão PBS 0,01M, contendo 134 mg% de cloreto de cálcio, ajustando-se o pH a 7.8, por 15 minutos a 37°C e a incubação com o anticorpo primário por 24 horas a 4°C. …”

Section: Methodsunclassified

Glicolipoproteína de Leptospira interrogans sorogrupo icterohaemorrhagiae: distribuição em fígado e rim de cobaias experimentalmente infectadas

Santos

Sakata

Yasuda

et al. 1989

Rev. Inst. Med. trop. S. Paulo

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RESUMOAcredita-se que as lesões teciduais na leptospirose possam decorrer da ação direta das leptospiras, de toxinas sintetizadas ou liberadas durante sua lise. O presente estudo visou a extração quimica da glicolipoproteína (GLP) da leptospira, a produção de anti-soro anti-GLP e a avaliação de sua distribuição em cortes de fígado e rim de cobaias inoculadas e sacrificadas em estudo seqüencial diário até o 6? dia de infecçâo, correspondente ao pico da doença. Procurou-se também correlacionar a expressão tecidual da GLP com o grau de lesões locais, em busca de novos subsídios para a compreensão da patogenia da leptospirose. A QLP foi detectada em fígado e rim de 2 dentre 6 cobaias no 5? dia e em todas as 6 no 6? dia de infecção, sob a forma de grânulos no citoplasma de macrófagos, livres no interstício ou acolados à membrana de células endoteliais e parenquimatosas, especialmente nas regiões mais lesadas. A cronologia do aparecimento da GLP e sua distribuição sugerem tratar-se de produto de lise de leptospiras fagocitadas por macrófagos e que esta substância, conquanto não comprovada como iniciadora das lesões, associa-se a seu agravamento nas etapas mais avançadas da leptospirose.IMTERMOS. Glicolipoproteína; Leptospirose; Imunohistoquímica. INTRODUÇÃOEstudos clínicos e anátomo-patológicos da leptospirose têm sugerido que as lesões ou as disfunções orgânicas possam ser causadas pela ação direta das leptospiras, por toxinas elaboradas por essas bactérias ou liberadas durante a sua lise 2,4,5,6,9,10,11,23,29. Diversas tentativas de isolamento e caracterização de possíveis fatores tó-xicos, foram realizadas por STALHEIM 24 , MIL-LER e cols.* JACKSON & ZEY 16 , KNIGHT e cols. 17 e FAINE e cols. ,5 . A ação citotóxica do sorotipo pomona sobre cultura âe fibroblastos foi demonstrada por YAM e cols. 28 , sem entretanto caracterizar a natureza química responsá-vel por essa atividade tóxica. Já, VINH e cols. 27 extrairam do sorotipo Copenhagen!, tanto de cepas virulentas quanto de cepas avirulentas, uma glicolipoproteína (GLP) de efeito citotóxico sobre fibroblastos de camundongos e sugeriram ser o componente lipídico dessa GLP o fator responsável por essa toxicidade.(1) Divisão de Patologia, Instituto

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“…All patients presented with a clinical and epidemiologic picture compatible with leptospirosis. Diagnosis was confirmed either by at least a 4-fold rise in the microagglutination titer, a single microagglutination titer greater than 1:400, and/or detection of leptospiral antigen in biopsy or autopsy specimens [9,21]. All cases were ascribed as leptospirosis in the final reports, based on the findings in organs such as liver, kidneys, and lungs.…”

Section: Study Populationmentioning

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Immune receptors and adhesion molecules in human pulmonary leptospirosis

Bernardi¹,

Ctenas²,

Silva³

et al. 2012

Human Pathology

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An immunohistochemic assay to localize leptospires in tissue specimens

Abstract: SUMMARYAn Immunoperoxidase technique for identification of leptospires in formalin fixed, paraffin embedded kidney sections is presented, using peroxidase-anti¬ peroxidase complex. The anti-leptospiral antibody was raised in rabbit. Possible applications of this technique are discussed.

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Immunohistochemical detection of Lp25 and LipL32 proteins in skeletal and cardiac muscles of fatal human leptospirosis

Immunohistochemical detection of Lp25 and LipL32 proteins in skeletal and cardiac muscles of fatal human leptospirosis

Glicolipoproteína de Leptospira interrogans sorogrupo icterohaemorrhagiae: distribuição em fígado e rim de cobaias experimentalmente infectadas

Immune receptors and adhesion molecules in human pulmonary leptospirosis

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