Filter paper performance in PCR for cutaneous leishmaniasis diagnosis

Mota, Camila Alves; Venazzi, Eneide Aparecida Sabaini; Zanzarini, Paulo Donizeti; Aristides, Sandra Mara Alessi; Lonardoni, Maria Valdrinez Campana; Silveira, Thaís Gomes Verzignassi

doi:10.1590/0037-8682-0047-2020

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“…The obtained results can be explained by the fact that, in the FTA ELUTE CARDS ® , the DNA cannot be distributed in a uniform manner by the card in which the sample was fixed to the matrix (Cox et al, 2010), which can result in a false negative result. The samples fixed in cards have been described for the diagnosis of many diseases, including leishmaniosis, as an interesting alternative to obtain the DNA, facility in transport, in to the biological safety, since the fixed cells are completely lysed (Bankamp et al 2019;Ali et al,2020;Mota et al, 2020).…”

Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

Detection of Leishmania spp. in canine serum fixed in card

Petry

Rolim

Soares

et al. 2022

RSD

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Visceral leishmaniasis is a serious zoonosis, and its molecular diagnosis is an important strategy. The detection of Leishmania spp. DNA from biological samples fixed in cards could solve problems related to the collect and transport of biological samples. The purpose of this study was to detect Leishmania spp. by PCR, using canine serum fixed in cards (CSFC). For evaluation, the PCR with DNA extracted from CSFC (PCR/card) was compared to the PCR with DNA from the same serum extracted using the Qiagen kit (PCR/Qiagen) and the immunochromatography test (Rapid test - RT). The results showed that out of the 112 analyzed samples, 12 (10.71%) were positive in the PCR/Qiagen, and of those, only two failed to amplify with DNA extracted from the CSFC. The RT was positive in 11 (9.8%) samples; however, only 3 (2.75%) samples of the total agreed with the detection of Leishmania spp. through PCR. Considering the PCR/Qiagen test as the reference standard for DNA detection, the agreement with the PCR/card was nearly perfect (K = 0.8). The concentration and purity of DNA in the two extractions were not significantly different. The use of PCR with DNA from CSFC showed that it can be an interesting alternative for the diagnosis of leishmaniasis.

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Section: Discussionmentioning

confidence: 99%

Detection of Leishmania spp. in canine serum fixed in card

Petry

Rolim

Soares

et al. 2022

RSD

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“…Quando consideramos o RPR como referência, os resultados falso positivos sugerem que pode não ter ainda transferência de anticorpos maternos ao feto, mas que a bactéria atravessou a barreira placentária. Já nos resultados falso negativos sugerem a transferência de anticorpos maternos, pois RN ainda não tem anticorpos próprios, mas que não houve transferência da bactéria, ou podem ser explicado por uma possível carga bacteriana baixa circulando no sangue, ou ainda pela não homogeneidade com que o DNA presente no sangue se espalha no cartão, assim algumas amostras só se mostraram positiva nas amostras de LCR (Michelow et al,2002;Castro et al,2016;Mota et al,2021) .…”

Section: Discussionunclassified

“…Não foram encontrados estudos com SFC para detecção do T.pallidum, mas um tipo de papel filtro o cartão de Guthrie (teste do pézinho) já é utilizado com sucesso na triagem neonatal de várias doenças e o cartão Whatman (FTA-elute ou Classic) já faz parte da detecção de outros agentes biológicos (Bankamp et al,2019;Ali et al,2020;Mota et al,2021).…”

Section: Discussionunclassified

Detecção de Treponema pallidum em amostras de sangue fixadas em cartão para diagnóstico da sífilis congênita

Grassi

Melo

Grassi

et al. 2021

RSD

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A sífilis congênita (SC) é uma doença de transmissão vertical causada pelo Treponema pallidum provocando uma infecção do bebê ainda no útero. O diagnóstico da SC é difícil e tem sido feito por uma combinação de critérios clínicos e laboratoriais, o que torna necessário a busca por novos métodos de diagnóstico para auxiliar a tomada de decisão. Os testes moleculares, apesar de ainda não serem rotina nos laboratórios, estão sendo cada vez mais utilizados. A etapa pré-analítica de coleta da amostra, extração e preservação do DNA é fundamental. O uso de sangue fixado em cartão (SFC) tem sido uma alternativa no diagnóstico de várias doenças pela facilidade na execução da etapa pré-analítica. Nosso trabalho teve como objetivo detectar T. pallidum por reação em cadeia da polimerase (PCR) a partir de SFC de recém-nascidos que tiveram resultado positivo no PCR com a amostra de líquido cefalorraquidiano (LCR). Foram analisadas 82 amostras pareadas (sangue e LCR) de 41 RN na do Hospital da Criança Santo Antônio (HCSA), de Porto Alegre, RS, Brasil, sendo 22 positivas e 19 negativas. A sensibilidade e especificidade foram 63,3% e 100%, respectivamente. A concordância entre os métodos foi substancial (K=0,619), mostrando que a PCR diretamente de SFC pode ser promissora, desde que aperfeiçoada sendo uma possibilidade de diagnosticar a SC e facilitar a triagem neonatal.

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Filter paper performance in PCR for cutaneous leishmaniasis diagnosis

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Detection of Leishmania spp. in canine serum fixed in card

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Detecção de Treponema pallidum em amostras de sangue fixadas em cartão para diagnóstico da sífilis congênita

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