El objetivo del estudio fue realizar la caracterización bioinformática, así como optimizar la producción de L-asparaginasa extracelular de Bacillus sp. M62 aislada de las salinas de Maras (Cusco). Para ello, se verificó la producción de L-asparaginasa mediante el viraje del medio M9 modificado con azul de bromofenol 0.0075%, pH 7.4 a 37 °C por 72 h. A la vez, se extrajo el ADN genómico para amplificar los genes ribosómicos 16S y el gen ansA3. La secuencia aminoacídica codificada por el gen ansA3 se predijo mediante análisis bioinformático. La producción de L-asparaginasa intracelular y extracelular se evaluó a diferentes niveles de glucosa, L-asparagina, NaCl y pH en el medio M9 modificado. Adicionalmente, las actividades enzimáticas de L-asparaginasa y L-glutaminasa se determinaron mediante cuantificación del amonio liberado por el método de Nessler. Así, Bacillus sp. M62 produjo el viraje del medio M9 modificado, obtuvo alta similitud y cercanía evolutiva con Bacillus licheniformis, se encontró que el gen ansA3 amplificado codificaba para 319 aa, dentro de la cual se predijo una secuencia patrón del sitio activo (GFVITHGTDTM ) y 15 sitios inmunogénicos. La producción de L-asparaginasa extracelular fue superior a la intracelular, la que se optimizó de 0.37 U/mL (0.24 U/mg) a 2.15 ± 0.39 U/mL (0.63 U/mg). Finalmente, se encontró que Bacillus sp. M62 presenta L-asparaginasa extracelular con mínima actividad de L-glutaminasa.
Objetivo. Caracterizar flavonoides presentes en el extracto y subextracto metanólico de las hojas de Apium graveolens var. Rapaceum, DC. “Apio-nabo”. Materiales y métodos. Se elaboró un extracto y subextracto metanólico de las hojas Apium graveolens var. Rapaceum, DC. “Apio-nabo”. Se determinó la solubilidad del extracto metanólico en solventes de polaridad creciente. Se detectaron los componentes químicos del extracto y subextracto metanólico mediante un tamizaje fitoquímico empleando gelatina, tricloruro férrico, reactivo de Shinoda, reactivo de Dragendorff y reactivo de Ninhidrina, entre otros. Se ejecutó cromatografía en capa fina y mediante espectroscopia UV/Vis se propuso estructuras químicas para los metabolitos tipo flavonoides presentes en el extracto y subextracto metanólico de hojas de Apium graveolens var. Rapaceum, DC. “Apio-nabo”. Resultados. El extracto metanólico de hojas de Apium graveolens var. Rapaceum, DC fue soluble en solventes polares. Los metabolitos secundarios encontrados son compuestos fenólicos tipo flavonoides, taninos y alcaloides en el extracto y subextracto metanólico. Se propuso tres estructuras químicas de flavonoides a través del análisis de los espectros UV/Vis, y mediante comparación con lo publicado por TJ Mabry y Olga Lock. Conclusión. Se caracterizó la posible estructura química de tres metabolitos secundarios tipo flavona encontrados en el subextracto metanólico de hojas de Apium graveolens var. Rapaceum, DC.
scite is a Brooklyn-based organization that helps researchers better discover and understand research articles through Smart Citations–citations that display the context of the citation and describe whether the article provides supporting or contrasting evidence. scite is used by students and researchers from around the world and is funded in part by the National Science Foundation and the National Institute on Drug Abuse of the National Institutes of Health.
hi@scite.ai
10624 S. Eastern Ave., Ste. A-614
Henderson, NV 89052, USA
Copyright © 2024 scite LLC. All rights reserved.
Made with 💙 for researchers
Part of the Research Solutions Family.