HRM analysis is an appealing technology for HFE gene screening. It is a robust technique that can be widely adopted in diagnostic laboratories to facilitate gene mutation screening.

Appropriatezza della richiesta di esami di laboratorio nella diagnosi delle malattie autoimmuni sistemiche SUMMARY Autoimmune diseases are caused by an immune response against some autoantigens. This response, characterized by the presence of autoantibodies, causes an inflammatory disease, which can cause a damage of specific organ (organ-specific autoimmune diseases) or systemic (systemic autoimmune diseases). The presence of these autoantibodies in the serum can therefore be a useful parameter for the diagnosis and/or monitoring of autoimmune diseases In this paper we describe a flow chart about laboratory tests in the diagnosis of systemic autoimmune diseases so as to maintain appropriateness of the request and contain costs.

INTRODUZIONEL'infezione da virus dell'epatite C (HCV) colpisce 170 milioni di persone in tutto il mondo (14). Di queste solo il 20-30% guarisce spontaneamente; il rimanente sviluppa un'infezione cronica con rischio di evoluzione a cirrosi ed epatocarcinoma (7,9). Il 50% dei pazienti affetti da epatite C cronica risulta non rispondere alla terapia con αinterferone pegilato e ribavirina (1,2,4,8,15). Recentemente sono stati descritti due polimorfismi (SNPs) in associazione al gene codificante per l'interleuchina 28 (IL-28). In particolare il polimorfismo rs12979860 (C/T), situato 3 kb a monte del gene, risulta associato a una rapida e precoce risposta alla terapia (genotipo C/C) (3, 10-13). Scopo del nostro studio è quello di mettere a punto un metodo rapido e di semplice esecuzione per effettuare lo screening del polimorfismo rs12979860. MATERIALI E METODISono stati analizzati i campioni di sangue provenienti da 329 pazienti HCV positivi di cui 46 coinfetti con HIV. Il DNA è stato estratto da leucociti di sangue periferico utilizzando il kit commerciale di estrazione QIAsymphony DNA mini kit. I campioni sono stati analizzati attraverso High Resolution Melting (HRM) che consente un semplice e rapido screening del polimorfismo rs12979860 (5, 6). L'analisi è stata effettuata su Rotor Gene Q (Qiagen) utilizzando una Master Mix HRM 1X (Qiagen), contenente: deossinucleotidi trifosfato (dNTPs), HRM PCR Buffer, Q solution e Eva