The aim of this study was to develop a dynamic culture medium containing FSH, LH and EGF to promote the in vitro development of oocytes obtained from goat preantral follicles to complete maturation and to improve the capacity of these oocytes for in vitro fertilization (IVF) and embryo production. For experiment I, preantral follicles were cultured for 18 days in medium supplemented with increasing concentrations of FSH (T1 - control) or in control medium added LH alone or in association with EGF: T2 (LH 50 ng/ml), T3 (LH 50 ng/ml + EGF 50 ng/ml), T4 (LH 50 ng/ml + EGF 100 ng/ml), T5 (LH 100 ng/ml), T6 (LH 100 ng/ml + EGF 50 ng/ml) and T7 (LH 100 ng/ml + EGF 100 ng/ml). For experiment II, preantral follicles were cultured only in the culture medium used in T7, and after 18 days, their oocytes underwent in vitro maturation (IVM) followed by IVF. At the end of the culture period, T3, T4 and T7 had a positive influence on the daily follicular growth rate. Oocytes grown in T4 and T7 had a meiosis resumption percentage significantly superior to the other treatments. Two embryos were obtained, in which preantral follicles in medium supplemented with 100 ng/ml LH and 100 ng/ml EGF (T7). In conclusion, our sequential culture system was able to promote the in vitro growth of preantral follicles, promoting their oocyte maturation and caprine embryo production from preantral follicles.
This study evaluates the effects of ascorbic acid and its interaction with follicle-stimulating hormone (FSH) on the morphology, activation, and in vitro growth of caprine preantral follicles. Ovarian fragments were cultured for 1, 7, or 14 d in minimum essential medium (MEM) containing ascorbic acid (50 or 100 μg/mL), FSH (50 ng/mL), or both of these substances. Ovarian tissue that was either fresh (control) or cultured for 1, 7, or 14 d was processed for histological and ultrastructural evaluation. The results showed that after 14 d of culture, medium supplemented with 50 μg/mL of ascorbic acid alone or combined with FSH showed higher rates of follicular survival compared with MEM. After 7 d of culture, FSH, ascorbic acid at 50 μg/mL with or without FSH, and ascorbic acid at 100 μg/mL increased the percentage of follicular activation compared to fresh control. In addition, FSH alone significantly increased the percentage of growing follicles after 14 d. The combination of 50 μg/mL of ascorbic acid and FSH promoted a significant increase in oocyte and follicular diameter after 7 d of culture. Ultrastructural and fluorescent analysis confirmed the integrity of follicles cultured with 50 μg/mL of ascorbic acid and FSH after 14 d. In conclusion, the combination of 50 μg/mL of ascorbic acid and FSH maintained follicular integrity and promoted follicular activation and growth after long-term in vitro culture of caprine preantral follicles.
Summary This study investigated the effect of three different culture media (α minimum essential medium (α-MEM), McCoy or TCM199 during the in vitro culture (IVC) of bovine isolated pre-antral follicles. Pre-antral follicles greater than 150 μm in size were isolated and cultured for 0 (control), 8 or 16 days in one of the abovementioned culture media. Follicles were evaluated for survival, growth and antrum formation at days 8 and 16. The results showed that TCM199 was the most suitable medium to preserve follicular viability and ultrastructure, resulting in the highest rates of antrum formation. In conclusion, TCM199 promotes the in vitro development of isolated pre-antral follicles without hampering follicular functionality by sustaining in vitro growth and antrum formation.
Resumo: Introdução: Com a interrupção das atividades educacionais das universidades por causa da pandemia da Covid-19, formas de ensino virtuais, como a educação remota (ER), passaram a ser debatidas no meio acadêmico. No entanto, faz-se necessária uma avaliação criteriosa da ER antes de sua aplicação visando à qualidade do ensino. Objetivo: Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a viabilidade da implantação da ER para discentes de um curso de Medicina. Método: Aplicou-se um formulário on-line no qual constavam questões sobre aspectos demográficos e socioeconômicos, sobre acesso às tecnologias digitais e uma pergunta subjetiva relacionada ao uso da ER. Os dados quantitativos foram comparados pelos testes Kruskal-Wallis e Mann-Whitney com p < 0,05. Analisaram-se os dados qualitativos por meio do método de Classificação Hierárquica Descendente, e houve ainda uma análise pós-fatorial. Resultados: O perfil socioeconômico de 266 participantes foi variado, sendo a maioria dos discentes brasileiros do sexo masculino, adultos jovens, cor da pele parda e renda familiar média elevada. Todos relataram ter acesso à energia elétrica, mas não à água encanada, à coleta pública de lixo e ao esgotamento sanitário. Todos possuíam pelo menos um equipamento eletrônico para acesso à internet, mas com variação no tipo e na velocidade da conexão. Um total de 80,8% dos discentes avaliou como viável a implantação da ER para o seguimento do curso. No entanto, 8,65% dos discentes afirmaram que os equipamentos e a internet disponíveis não permitiriam o acompanhamento das atividades on-line. Foi observada uma correlação significativa entre a velocidade de acesso à internet e a renda familiar média, a cor da pele e o local da residência (p < 0,05), bem como entre possuir equipamentos adequados à ER e a renda familiar média (p < 0,05). A análise da pergunta objetiva revelou seis categorias: a necessidade de organização dos procedimentos e o anseio pela volta à normalidade; custos e benefícios da ER; planejamento e garantia da acessibilidade de todos os estudantes à internet de qualidade; acreditar que a realização da ER não é a solução para o problema; capacitação de professores e acadêmicos para o uso das plataformas digitais; e o querer realizar a ER; surgindo uma variedade de opiniões, visões e realidades pelos discentes. Conclusão: Apenas o seguimento da ER, sem garantia de acesso para todos os discentes, é insuficiente e necessita da intervenção dos gestores para não haver prejuízo na aprendizagem daqueles menos favorecidos.
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