No abstract

The aim of this work was to study the influence of sucrose and glucose, amino acids and BAP (6-Benzylaminopurine

; GEFERSON DAVI WOLF 3 ; FLÁVIO ZANETTE 4 RESUMO -Com o objetivo de estudar a morfogênese em tecidos caulinares e radiculares de caquizeiro, foram conduzidos diversos experimentos a campo e in vitro. Os experimentos a campo consistiram numa série de trabalhos que envolveram a estaquia de caule e de raiz, a mergulhia e a alporquia do caquizeiro 'Fuyu'. Na estaquia de caule, foram testados o número de folhas, concentrações de AIB, o estiolamento localizado e total. Na estaquia de raiz, foram testados o diâmetro e a posição da estaca. A mergulhia foi testada a campo e em recipientes, sendo combinanda com o estiolamento das brotações, anelamento e aplicação de AIB. Na alporquia, foram testados o anelamento e a aplicação de AIB, sendo os alporques utilizados para outro teste com AIB. Os experimentos in vitro foram conduzidos com plantas juvenis, sendo um trabalho realizado para a indução de organogênese a partir de segmentos radiculares com BAP, TDZ e cinetina (10µM), combinados com AIA (0,01µM), e outro para a indução do enraizamento de brotações pela permanência em meio de cultura com 25mg.L -1de AIB e posterior transferência para outro meio de cultura isento de reguladores de crescimento e com carvão ativado. Em todos os experimentos de estaquia de caule, mergulhia e alporquia, não ocorreu a formação de raízes. Apenas na estaquia de raiz houve organogênese, onde as melhores respostas de brotação e enraizamento foram obtidas com as estacas de maior diâmetro e na posição vertical. A organogênese também foi observada em segmentos radiculares in vitro, com uma grande proliferação de calos e gemas induzida pelo uso de TDZ mais AIA. Ao contrário do observado a campo, as brotações caulinares in vitro enraizaram com uma taxa de 66%, com uma emissão média de 4,7 raízes por brotação, mostrando ser uma técnica promissora de clonagem do caquizeiro.Termos para indexação: Diospyros kaki, estaquia, mergulhia, alporquia, estiolamento, reguladores de crescimento. ORGANOGENETIC POTENTIAL IN STEM AND ROOT TISSUE OF JAPANESE PERSIMMONABSTRACT -With the objective of studying the morfogenesis in stems and root tissue of japanese persimmon, several experiments were conducted in the field and in vitro. The field experiments consisted of a series of works that involved the cutting of the stem and of the root, the layer and the air-layer of the japanese persimmon ' Fuyu'. In the cutting of the stem, the number of leaves, concentrations of IBA, the located and the total etiolation were tested. In the cutting of the root, the diameter and the position of the stake were tested. The layer was tested in the field and in recipients, being combined with the etiolation of the shoots, ring and application of IBA. In the air-layer the ring and the application of IBA were tested, being the air-layers used for another test with IBA. The experiments in vitro were conducted with juvenile plants, being a works accomplished for the organogenesis induction starting from root segments with BAP, TDZ and cinetina (10µM), combined with IAA (0,01µM), ...

O porta-enxerto ‘Marubakaido’ é muito utilizado para a produção de mudas de macieira e tem sido multiplicado in vitro para a produção de plantas matrizes sadias. O protocolo de micropropagação pode ser mais eficiente a medida que seja promivido o aumento do número de brotações mais longas na fase de multiplicação. O objetivo do experimento foi testar o efeito do meio de cultura em dupla-fase e de concentrações de ácido giberélico (GA3) na multiplicação dessa cultivar. O delineamento experimental utilizado foi em blocos casualizados em arranjo fatorial, sendo dois tipos de meios de cultura (semi-sólido e dupla-fase) e três concentrações de GA3 (0, 1 e 5 µM), com cinco repetições e quatro frascos por parcela com cinco brotações por frasco. Foram avaliados dois subcultivos, com intervalo de quarenta e cinco dias. Os parâmetros analisados foram o número de brotações por explante, altura das brotações e massa fresca dos tufos de brotações. Não ocorreu interação entre os fatores estudados. O meio de cultura dupla-fase apresentou-se superior ao meio de cultura semi-sólido em todos os parâmetros analisados nos dois subcultivos. Os explantes cultivados no meio dupla-fase formaram tufos com brotações mais altas, em maior número e com maior massa fresca. GA3 não apresentou o efeito esperado de alongamento das brotações. Para a multiplicação do porta-enxerto de macieira ‘Marubakaido’ recomenda-se a utilização do meio de cultura dupla-fase, não sendo necessária a adição de GA3.

A produção de mudas de caquizeiro (Diospyros kaki) pelo processo da enxertia sobre porta-enxertos provenientes de sementes, ocasiona problemas de desuniformidade vegetativa. O objetivo do trabalho foi contribuir para o desenvolvimento de um protocolo para a regeneração de brotações de caquizeiro do tipo café, a partir de raízes por organogênese indireta. Segmentos radiculares obtidos de embriões germinados in vitro foram isolados de sementes de frutos maduros em meio MS½NO3. As sementes receberam assepsia pela imersão em etanol 70% por um minuto, em solução de hipoclorito de sódio 2,5% por 20 minutos e quatro lavagens em água esterilizada. No primeiro experimento, os segmentos radiculares de 2cm foram isolados em meio de cultura MS½NO3 acrescido de 0,01µM de ácido indolacético e quatro tipos de citocininas nas concentrações 1 e 10µM: zeatina, 6-benzilaminopurina, 2-isopenteniladenina e thidiazuron. No segundo experimento, para o enraizamento das brotações, foram testados quatro períodos de permanência em meio com 10µM de ácido indolbutírico: 0, 5 10 e 15 dias. A maior regeneração de brotos (1,2 brotos por explante) ocorreu na combinação 1µM de zeatina com 0,01µM de ácido indolacético. As brotações juvenis obtidas possuem potencial natural para o enraizamento, sendo necessário novos estudos para confirmar o efeito da aplicação de auxinas.

O substrato deve promover o crescimento das plantas, sendo um componente importante durante a aclimatação das plantas micropropagadas. O objetivo desta pesquisa foi avaliar os efeitos de diferentes substratos durante a aclimatação da uva de raposa cv. Bordô. O experimento foi realizado em casa de vegetação nos meses de fevereiro e março de 2009. Cinco substratos foram testados: Plantmax® HT, Plantmax® HT: fibra de coco (7,5: 2,5 v / v), Plantmax® HT: fibra de coco ( 1: 1 v / v), Plantmax® HT: fibra de coco (2,5: 7,5 v / v) e fibra de coco. O processo de aclimatação consistiu em três fases. Após 20 dias de cultura in vitro, foi removido o filme de PVC (cloreto de polivinil) que cobria os frascos e após dois dias, os frascos tinham tampas abrindo parcialmente por duas horas nas condições da sala de crescimento. As plantas foram transferidas para os diferentes substratos e colocadas em casa de vegetação com nebulização intermitente durante 16 dias seguidos por 20 dias de irrigação manual diária. O melhor substrato para aclimatação da uva de raposa cv. O Bordô foi o Plantmax® HT, beneficiando a formação de raízes e parte aérea das plantas. A fibra de coco não deve ser usada sozinha como substrato ou em proporções maiores que 25% na mistura com Plantmax® HT.

RESUMOObjetivou-se, neste trabalho, estudar a indução da organogênese em segmentos foliares e internódios de videira cv. Merlot, utilizando diferentes tipos e concentrações de citocininas. O meio de cultura usado foi o MS com redução da metade dos sais e vitaminas, suplementado com 1 µM de ácido naftalenoacético (ANA). Os tratamentos consistiram das concentrações de 2,5; 5,0 ou 10 µM de 6-benzilaminopurina (BAP) ou 1-fenil-3-(1,2,3,-tiadiazol-5-il) uréia (TDZ). Foram avaliados o porcentual de formação de gemas, calos, oxidação e raízes, além do número de raízes e gemas. Aos 60 dias de cultivo in vitro foi observado que concentrações de 2,5-10 µM de BAP e TDZ permitem que segmentos foliares oxidem e não induzam à oxidação nos internódios. O nível de 5 µM de TDZ favore o maior porcentual de formação de gemas em internódios e segmentos foliares não apresentam capacidade para formar gemas nos níveis de 2,5-10 µM de BAP ou TDZ. O uso de BAP nas concentrações de 2,5 e 5 µM favorece altos porcentuais de enraizamento em internódios. O uso de TDZ no nível de 2,5 µM promove elevada taxa de formação de calos em internódios. Os internódios apresentaram maior capacidade organogênica do que os segmentos foliares. Termos para indexação:Vitis vinifera, enraizamento in vitro, morfogênese in vitro, oxidação fenólica, citocinina. ABSTRACTThe objective of this work was study the induction of organogenesis on leaf segments and internodes of grapevine cv. Merlot using different types and concentrations of cytokinins. MS half strength culture medium supplemented with 1 µM naftalenoacetic acid (NAA) was used. The treatments consisted of the concentrations of 2.5; 5.0 or 10 µM 6-benzilaminopurine (BAP) or thydiazuron (TDZ). The percentage of buds, callus, oxidation and roots as well as the number of roots and buds were evaluated. After 60 days of in vitro culture it was observed that the concentrations of 2.5-10 µM BAP or TDZ oxidize leaf segments and do not induce oxidation in the internodes. The level of 5 µM TDZ promote the largest formation of buds from internodes and leaf segments do not have capacity to form buds at the levels of 2,5-10 µM BAP or TDZ. The use of BAP at the concentrations of 2.5 and 5 µM promote high rooting percentage of internodes. TDZ at the level of 2.5 µM promotes high rate of callus formation in internodes. Internodes presented larger organogenic capacity than leaf segments.

RESUMO -O objetivo deste trabalho foi o estabelecimento de um protocolo para a embriogênese somática do caquizeiro. Como explantes, foram utilizados embriões zigóticos em diversos estádios de desenvolvimento, retirados de frutos coletados de plantas adultas a campo, a partir de quatro semanas após o pleno florescimento até 22 semanas. O meio básico para os experimentos foi o MS½NO 3 . O meio inicial de indução foi suplementado com 20µM de 2,4-D e 2µM de cinetina. Os calos escuros obtidos foram repicados para outro meio de indução, com concentrações 10 ou 20 µM de 2,4-D e 2 µM de cinetina. Os calos com massas pró-embriogênicas obtidos foram transferidos para meio de manutenção e multiplicação com 2 µM de cinetina e 2,4-D nas concentrações 2,5; 5,0 e 10 µM. As massas embriogênicas formadas foram transferidas para meio de maturação suplementado com 0,5 µM de AIB e as concentrações 5; 10 e 20 µM de 2-iP. Os embriões formados foram isolados em dois meios de conversão, sendo o primeiro com 5 µM de 2-iP, 5 µM de AG 3 e 0,5 µM de AIB e o segundo com 0,5 µM de AG 3 e BAP, nas concentrações 0; 0,25; 0,5 e 1,0 µM. Como resultados, obtevese o padrão indireto de embriogênese somática a partir de embriões zigóticos maduros, com mais de 22 semanas de formação, quando cultivados em meio de cultura com 10 µM de 2,4-D combinado com 2 µM de cinetina. A manutenção e a multiplicação das culturas embriogênicas foram mais eficientes com 5 µM de 2,4-D, na qual os pró-embriões avançaram para o estádio globular. Na fase de maturação, as concentrações de 2-iP testadas atuaram promovendo os embriões globulares a estádios mais avançados da ontogenia como cordiforme, torpedo e cotiledonar. A suplementação do meio de cultura com 1 µM de BAP e 0,5 µM de AG 3 gerou a formação de plantas mais desenvolvidas, com maior número e tamanho de folhas. Termos para Indexação: Diospyros kaki, cultura de tecidos, fruticultura, micropropagação. SOMATIC EMBRYOGENESIS OF JAPANESE PERSIMMONABSTRACT -The goal of this work was to develop a protocol for persimmon cloning through somatic embryogenesis. Zygotic embryos excised from fruits collected from adult plants were tested at several developmental phases. They were collected during 22 weeks after 4 weeks blossoming. The basic medium tested was MS½NO 3 . Initial induction medium was supplemented with 20 µM 2,4-D + 2 µM kinetin. Dark calluses obtained were transferred to induction medium, with concentrations of 10 and 20 µM 2,4-D + 2 µM kinetin. The calli with pro-embryogenic masses were transferred to a maintenance and multiplication medium, with 2 µM kinetin and 2,4-D at the concentrations of 2.5, 5.0 and 10 µM. Embryogenic masses formed were transferred to a maturation medium supplemented with 0.5 µM IBA and 5, 10 and 20 µM 2iP. Embryos formed were isolated in two conversion media, one with 5 µM 2-iP + 5 µM GA 3 and 0.5 µM IBA, and another medium with 0.5 µM GA 3 and BAP at 0, 0.25, 0.5 and 1.0 µM. Indirect somatic embryogenesis were obtained from mature zygotic embryos collected after 22 weeks, when cultivat...